生物化学问答题.pdfVIP

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生物化学问答题 (1)试举例比较蛋白质、核酸各自结构与其功能的相互关系。 血红蛋白由4 个亚基(多肽链)组成,每个亚基都有一个血红素基。血红蛋白以两种可以相 互转化的构象态存在,称T (紧张态)和(R 松弛)态。T 态是通过几个盐桥稳定的,无氧 结合时达到最稳定。氧的结合促进T 态转变为R 态。氧与血红蛋白的结合是别构结合行为 的一个典型例证。T 态和R 态之间的构象变化是由亚基—亚基相互作用所介导的,它导致血 红蛋白出现别构现象。Hb 呈现出3 种别构效应。 第一,血红蛋白的氧结合曲线是 S 形的,这意味着氧的结合是协同性的。氧与一个血红素 结合有助于氧与同一分子中的其他血红素结合。 第二,H+和CO2 促进O2 从血红蛋白中释放,这是生理上的一个重要效应,它提高O2 在 代谢活跃的组织如肌肉中的释放。相反地,O2 促进H+和CO2 在肺泡毛细血管中的释放。 H+ 、CO2 和O2 的结合之间的别构联系称为Bohr 效应。 第三,血红蛋白对O2 的亲和力还受2 、3-二磷酸甘油酸(DPG )调节,DPG 是一个负电荷 密度很高的小分子。BPG 能与去氧血红蛋白结合,但不能与氧合血红蛋白结合。因此,BPG 是降低血红蛋白对氧的亲和力的。氧的S 形曲线结合,波尔效应以及DPG 效应物的调节使 得血红蛋白的输氧能力达到最高效应。同时由于能在较窄的氧分压范围内完成输氧功能,因 此使肌体的氧水平不致有很大的起伏。此外血红蛋白使肌体内的pH 也维持在一个较稳定的 水平。血红蛋白的别构效应充分地反映了它的生物学适应性、结构与功能的高度统一性。 (2 )试述G 蛋白信号转导系统的作用机理 G 蛋白即 GTP 结合蛋白,亦称核苷酸调节蛋白(N 蛋白),是一种与膜受体偶联的异三聚 体结合蛋白,其具有与GTP 结合并催化GTP 水解成GDP 的能力,由α、β、γ三个亚基 组成,充当细胞膜上受体和靶酶之间的信号传递体。另外还发现一种分子量较小的“小 G 蛋白(small GTP-blinding protein )”,其特点是它们都是单体,存在于不同的细胞部位,在 细胞信号传递中也扮演着重要角色。 G 激素蛋白信号转导系统的作用机理有两种:一是各种含氮激素作为第一信使与靶细胞膜中 的特异受体结合,使G 蛋白活化,进而再使cAMP 酶活化,催化ATP 形成cAMP,作为第 二信使的cAMP 经一系列的相关反应级联放大,即先激活细胞内的蛋白激酶A (PKA ),再 进一步诱发各种功能单位产生相应的反应,cAMP 起着信息的传递和放大作用;即跨膜信号 传送。二是激素通过结合到细胞表面的激素受体上,激活 G 蛋白,G 蛋白开启磷酸肌醇酶 的催化活性,通过导致磷酸肌醇的级联放大而起作用,从而在许多种细胞种引起广泛的不同 反应。在磷酸肌醇酶催化下先产生二酰基甘油(DAG )和肌醇三磷酸(IP3 )。DAG 进一步 活化蛋白激酶 C (PKC ),促使靶蛋白质中的苏氨酸残基与丝氨酸残基磷酸化,最终改变一 系列酶的活性;IP3 则打开Ca2+通道,升高细胞质内Ca2+浓度,改变钙调蛋白和其他的钙 传感器的构象,使之变得更易于与其靶蛋白质结合改变;即胞内信号传送。 (3 )DNA 半保留复制的机理是通过哪些重要实验证明的?该复制方式的揭示有何重要意 义? 1958 年Meselson 和Stahl 利用氮的同位素 15N 标记大肠杆菌DNA ,首先证明了DNA 的半 保留复制。他们让大肠杆菌在以15NH4Cl 为唯一氮源的培养基上生长,连续培养12 代,从 而使所有DNA 都标记上15N 。15N-DNA 的密度比普通14N-DNA 的大,在氯化铯密度梯度 离心时,这两种DNA 形成不同的条带。如果将15N 标记的大肠杆菌转移到普通培养基(含 14N 的氮源),经过一代后,所有DNA 的密度都介于15N-DNA 和14N-DNA 之间,即形成 了一半含15N 一半含14N 的杂合分子;两代后14N 和14N—15N 杂合分子等量出现。若现 培养,可以看到 14N 分子增多。当把 14N—15N 杂合分子加热时,它们分成14N 链和 15N 链。这就充分证明了,在DNA 复制时原来的DNA 分子被分成了两个亚单位,分别构成子 代分子的一半,这些亚单位在经过很多代后仍然保持完整。 1963 年,Cairns 用放射自显影的方法第一次观察到完整的正在复制的大肠杆菌染色体DNA 。 他用这种方法阐明了大

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