叶绿素荧光在生理生态研究中的应用.pptVIP

叶绿素荧光在植物生理生态研究中的应用探讨  ——案例分析 中国科学院植物研究所 姜闯道 博士 副研究员 目录 一.叶绿素荧光的发现及发展 二.重要的荧光参数及其意义 三.荧光技术在逆境研究中的应用案例 四.相关汉语文献及其他 一.叶绿素荧光的发现及发展发现 德国植物生理学家Kautsky于1931年发现 叶绿素荧光动力学现象。 上世纪80年代，Ögren（1985）和Schreiber（1986）相继创制出便携的调制式荧光仪，并实现了商品化。成为光合作用研究的新热点，极大地推动了光合过程中光能利用、逆境条件下光合作用的光抑制、光破坏及其防御机制的研究。 叶绿素荧光动力学研究得到广泛应用的原因 1、叶绿素荧光动力学特性包含着光合作用过程的丰富信息 ●光能的吸收与转换 ●能量的传递与分配 ●反应中心的状态 ●过剩光能及其耗散 ●光合作用光抑制与光破坏……等等 2、可以对光合器官进行“无损伤探查”，获得 “原位”的（in situ）信息。 3、近年来测定仪器的性能和自动化程度越来越高，操作步骤越也来越简便。 由于以上原因 叶绿素荧光动力学技术在： ●光合作用生理生态 ●逆境生理 等研究领域得到了较快的普及和广泛的应用   二. 重要的荧光参数 基础荧光参数 ●Fo：最小荧光产量(Minimal fluorescence) ，也称初始荧光产量(Original fluorescence) 或基础荧光产量 。是对充分暗适应叶片（PSⅡ反应中心处于完全开放状态）照以极弱的测量光后发出的荧光。此时光化学猝灭系数qP＝1，非光化学猝灭系数qNP＝0。一般认为，这部分荧光是在天线中的激发能尚未被反应中心捕获之前，由天线叶绿素发射出的。当存在天线热耗散时，Fo会降低；当反应中心失活或遭到破坏时，Fo会提高。已知过高的温度往往使PSII放氧复合体脱离，反应中心失活。此时Fo会明显提高。因此，可以用Fo随温度的变化动态来反映高温对光合器的危害，并用来评价植物的抗热性。 ●Fm：最大荧光产量(Maximal fluorescence)， 是PSⅡ反应中心完全关闭时的荧光产量。此时光化学和非光化学荧光猝灭均为0 (qP＝0，qNP＝0)。 Fm可反映通过PSⅡ的电子传递最大潜力。通常叶片经暗适应至少20min后照以饱和脉冲光后测得。 ●Fs: 稳态荧光产量。即在光照下，光-暗反应达到动态平衡时的荧光产量。 存在的问题 ● 关于荧光发射的理论基础和对测定结果的理解和解释十分复杂； ● 部分初学者，对荧光参数的意义理解不透，尤其是不了解叶绿素荧光动力学特性在整个光合过程中所占的地位，因而对荧光参数测定结果的意义存在一些误解。 我们的主要应用 ● 光合机构的激发能分配； ● 光系统II的光抑制； ● 环境胁迫下光系统II活性。 三. 荧光技术在逆境研究中的应用案例 （一）荧光技术在叶片发育中的应用分析 选题依据 1、为什么选择生长过程中的叶片进行研究？ 以往对植物环境适应性的研究主要强调植物成熟叶片的适应机制； 叶片生长过程中同样会经历环境胁迫，而且幼叶对环境胁迫的适应性也直接关系到植物能否适应环境。 1 叶片生长过程中光合能力的变化 2 叶片生长过程中光化学效率和电子传递活性的变化 3 叶绿体色素的变化 5 叶片水分状况与叶黄素组分及活性氧清除酶活性之间的相关性分析         6 叶片生长过程中叶角的变化及对光能截获和光抑制的影响 皇冠草属于泽泻科、刺果泽泻属，多年生挺水植物，原产于南美亚马逊流域及其支流 。易驯化为沉水植物。用途：观赏等。 （二）荧光技术在淹水胁迫中的应用 科学/实践问题： 源于三峡库区消落带植被修复 植物淹水后复出后更容易死亡，为什么？ 问题转化： 淹水 陆地 光抑制导致光合器官/叶片出水后死亡？ 强光 高氧 弱光 低氧 试验设计 淹水后叶片形态特征的变化 淹水阶段净光合速率、气孔导度和蒸腾速率的变化 净光合速率 气孔导度 蒸腾速率 对照 气生叶 沉水叶 气生叶 对照 淹水阶段叶绿素含量的变化 气生叶 淹水阶段Fv/Fm和ΦPSⅡ的变化 沉水叶 气生叶 对照 出水后自然状态下叶片Fv/Fm和RWC的变化 出水后弱光环境下Fv/Fm的变化 出水后不同处理的离体叶片在强光下及恢复过程中光抑制的差异 （三）荧光技术在盐胁迫胁迫中的应用 科学问题： 盐胁迫下PSII失活与失活速率无关，主要抑制失活PSⅡ反应中心的。 极端光强和离体材料 田间？ 四.相关汉语文献及其他 相关汉语文献： 张守仁 1999 叶绿素荧光动力学参数的意义及讨论