生物化学检常用技术.pptxVIP

第三章 生物化学检验常用技术;;一、吸收光谱分析法;4;5;6;Lambert-Beer定律适用于: 可见光、紫外光、红外光和均匀非散射的液体以及分散均匀的固态或气态样品.; 在分光光度法中，为消除显色剂及样品中各种共存有色物质产生的干扰、抵消比色皿和试剂对入射光的影响而用来调节仪器百分透光率为100%的溶液。;(二)、分光光度法在生化检验中的应用;11;5.标准溶液设置的浓度范围足够大。;13;二、发射光谱分析法;火焰光度法是以火焰为激发光源，用光电检测系统测量被测元素所发射的辐射强度来进行定量分析的方法。 它是一种简化的发射光谱分析法;火焰光度法的特点;1、激发条件;（二）、荧光分光光度法;三、散射光谱分析法;;一、电位分析法― ISE;; 离子选择性电极的类型和品种很多，外形也差异很大；但基本结构都包括：对特定离子有选择性响应的薄膜(敏感膜或传感膜)、???参比溶液与内参比电极。 敏感膜将内侧参比溶液与外侧的待测离子溶液分开，是电极的关键部位。 ;电极电位;电极电位测量;;;玻璃膜电极;气敏电极; CO2 + H2O === HCO3- + H+ NH3 + H2O === NH4+ + OH- SO2 + H2O === HSO3- + H+ 2NO2 + H2O === NO3- + NO2- + H+ H2S + H2O === HS- + H3O+ HCN + H2O === H3O+ + CN- HF + H2O === H3O+ + F- ;;; ①标准曲线法 ②标准比较法 ③标准加入法 ;二、电导分析法;;一、干化学分析技术的基本原理;反射光度法; 漫反射光是指从光源发出的光进入样品内部，经 过多次反射、折射、散射及吸收后返回样品表面的光． ;差示电位法;二、干化学分析技术在临床检验中的应用;仪器检测: ;;一、电泳分析技术的基本原理;电泳迁移率;47; 溶液的酸碱度决定被分离物质的解离程度和带电性质及所带净电荷量。pH与pI差值越大，粒子带电量越多。;缓冲溶液的离子强度影响缓冲容量、电泳速度和产热效应;4、支持介质;二、常用电泳技术及应用;按电泳支持物分类;(五) 等电聚焦电泳 (IEF);;一、PCR反应基本原理; ;PCR基本反应步骤;第一轮循环;第二轮循环;第三次循环;;一种新的核酸微量分析技术。 尤其在定量RT-PCR中具有重要价值。 实现了PCR??术从定性到定量的飞跃。;实时PCR技术原理示意图;荧光定量PCR的临床应用;谢谢