药理和毒理动物实验设计的主要问题.ppt

药理和毒理研究中动物实验设计和实施注意的问题;对动物实验的要求 1、科学性（重复性） 2、经济性（高性价比） 3、伦理性（实验动物福利）; 目前在新药研发的动物实验方面存在一些低质量的研究试验工作。一是，所用动物的质量不高；二是，研究人员在动物实验设计和实施方面的训练不足；三是，实验动物福利观念不强，都是导致工作质量低，实验结果科学性不高的重要原因。; 药理和毒理试验涉及在实验人员的控制下，对动物施加一定的药物处理或操作，来发现是否药物处理在实验对象上引起一定的反应，或者对这种反应进行定量。 动物实验设计的主要目的一是保证所测变量的任何差异是由处理造成的，而不是其他非对照变量引起；另一个目的是通过控制确定的变量在尽可能小的范围内，减少所测反应的变异性，这样对处理效应的评介更准确。 ; 一、控制变量变异性的挑战： 我们知道，药理和毒理动物试验观察是在可变的一个背景上进行的，而且，这个可变的背景比起传统的物理化学实验所遇到的要大的多。 1、由于生命形式的化学过程（代谢）非常复杂。 2、动物对环境影响的积极适应，从遗传学方面讲动物的稳定性也是较差的。 3、实验动物福利法规对动物使用数量的限制。;;不准确的测量 测量仪器本身的不准确 观察的不准确 GLP是1970s FDA制定的实验操作标准，保证用于药品登记的实验数据可信准确。这种基于通过工作质量的保证实现实验数据信息可信准确的思想，为全球公认接受。GLP观念的引入明显减少了科学研究工作中测量方法产生的差异。;二）动物带来的差异 动物带给实验的差异是非常难以控制的。但在讨论到这个方面的时候一下几个方面的要求，是非常有益的。;1）动物来源的差别 由于遗传漂变可能来源于不同供货商的动物存在遗传学的差异，随后由于饲养的环境方面的差异造成表型上的差异。 加之，目前还没有两个供货商是采用完全一样的饲养管理程序或完全一样的饲养环境。而动物在产后的发育阶段是行为类型发育的敏感期，决定成年后保持行为类型和社会相互关系。因此有必要把动物来源的因素考虑到实验的设计中，并采用适当的控制手段检查是否还应延长时间让动物适应实验环境。;2）动物饲养管理的差别 动物饲养管理方面的微小变化会对动物的行为、生化和生理产生就巨大的影响。如，在其他环境条件恒定不变的情况下，只改变饲养人员就可使小鼠的繁殖性能显著下降。猜想这些影响群体性能的原因与视觉、听觉或嗅觉有关。因此明智的做法是保证动物在新的环境和更换饲养人员的情况下，至少让动物适应一定的时间，才能开始实验。;3）生活在不同的环境 动物对其生活的环境是敏感的，一个微小的变化都可以影响到它们的行为和生理学。这里我们强调的是动物所占据的空间—微环境的差别。例如，与进风口和排气口的相对位置不同、垂直位置不同，会造成物理、化学和微生物组成的空间差异。这些情况我们在进行实验设计时也应加以考虑。;4）动物健康状况 临床疾病会引起明显的疾病症状，患病的动物是不能用来做实验的。而亚临床疾病不表现出疾病症状，不容易判断它是否存在。它主要的影响有二。一是，疾病可能影响特定的器官，抑制它们的功能，改变动物的生理和生化状态。如果这一功能是实验过程的测定结果时，那么实验结果很可能产生偏差。二是，亚疾病从广义上讲，对动物的健康造成不利影响，使动物对研究的操作影响变得敏感。 感染带来的更大问题是疾病的严重程度根据动物的体质而变化，因此在实验的整个动物群体中差别被加大。;5）动物之间相互作用引起的差异 A、动物是群居还是独居要根据动物种属的行为学特性而定。实验前应了解所使用动物对群居的忍耐方式的不同，如，地鼠是独居动物，在实验条件下不适合群居生活；而小鼠的大多数品系独居是一种应激情形。3-5只小鼠最佳，或独居的动物给予一定的丰富生活的物品（遮掩物和玩具）可降低应激情形。 B、动物社会阶层的建立，会影响到实验的数据的差异。另外还要考虑动物建立社会等级的过程中，存在相当高的侵略性，群体中因而引起持续的应激和明显影响动物行为学、生理学和生化特征的情况。实验前将动物分组群居时，让动物等级社会完全建立稳定再进行实验处理是十分必要的。;三）正确设立对照 ;1）阳性对照 阳性对照的作用是作为一个标准测量各实验组间差异的程度，另一个是用来证明动物反应是可探测的，为实验方法提供质量控制。 2）阴性对照 阴性对照是期望正常状态不产生变化。阴性对照的目的是保证未知变量对实验组动物引起相反的效应不存在，即排除假阳性结果。;3）空白对照 是模拟处理组过程而实际上没有给予受试物或处理。 4）媒介物对照 在测试化合物溶于一种媒介时，这种研究要使用媒介物对照，与给测试物的方法一样，只给予媒介物。当与非处理的对照比较时，溶