hepg2细胞中与戊型肝炎病毒衣壳蛋白相互作用蛋白的初步研究-core.pdfVIP

第 2 2 卷 　第 5 期 病 　　毒 　　学 　　报 Vol . 22 　 　　　No . 5 2 0 0 6 年 9 月 　　　　　　　　　 CHIN ESE J OU RNAL OF V IROL O GY 　　　　　　　　　September 　　2 0 0 6 Hep G2 细胞中与戊型肝炎病毒衣壳蛋白相互作用蛋白的初步研究 吴小成 ,何水珍 ,郑子峥 ,孙媛媛 ,张军 ,夏宁邵 (厦门大学 　福建省医学分子病毒学研究中心 ,厦门　36 1005) ( ) ( ) 摘要 :利用重组戊型肝炎病毒 HEV 衣壳蛋白片段 p239 368～606 aa 形成的类病毒颗粒作为亲和层析诱饵蛋白, Hep G2 为细胞模型 ,筛选与 p239 类病毒颗粒特异性相互作用蛋白。经过二维电泳分离 , MALD ITOFM S 分析鉴 定得到 GRP78/ Bip ,HSP90 ,alp hatubulin 及 P43 四个与p239 有相互作用的候选蛋白。GRP78/ Bip 为热休克蛋白家 族成员 ,体外免疫共沉淀实验结果证实 ,其与p239 有特异性的结合 。此研究结果为深入研究 HEV 的感染过程如吸 附、入胞 , 以及 HEV 的致病机理提供了有益线索 。 ( ) ( ) 关键词 :戊型肝炎病毒 HEV ; 类病毒颗粒 VL P ; GRP78/ Bip ; 相互作用 ( ) 中图分类号 :R3732 Q78 　　文献标识码 :A 　　文章编号 :1000 - 872 1 2006 05 - 0329 - 05 ( ) ( ) 　　戊型肝炎 戊肝 是由戊型肝炎病毒 HEV 引 HEV 感染细胞机制的研究 。 起的、经消化道传播的急性肝炎 ,主要流行于发展中 此研究利用 p239 , 以 Hep G2 为细胞模型 ,采用 国家 。我国是戊肝的主要流行区 , 时有暴发或流行 亲合层析结合二维 电泳及生物质谱技术 , 筛选 的报道[ 1 , 2 ] 。HEV 为大小约 27 ～34nm 的单股正 Hep G2 细胞中与 p239 存在相互作用的蛋 白, 并利 链无包膜 RNA 病毒 ,其基因组包含 3 个开放读码 用体外免疫共沉淀进一步确证了他们的相互作用 , ( ) [2 ] 框架 ORFs ,ORF2 编码病毒衣壳蛋白 。HEV 难 为进一步深入研究奠定基础 。 以分离纯化 , 且体外培养系统仍不成熟 , 制约 了 HEV 感染过程的研究 。现有研究结果表 明 HEV 材料与方法 衣壳蛋 白中和表位主要集 中于 459 ～606 aa 区 域[3 - 5 ] ,本实验室在 E col i 中重组表达 HEV 衣壳 1 　试剂与材料 　Hep G2 来 自A TCC ,DM EM 为 Invitrogen 蛋白片段 p239 (368～606 aa)