大肠杆菌合成12丁三醇的途径优化-微生物学报-中国科学院.PDF

生 物 工 程 学 报 孙雷 等/大肠杆菌合成 1,2,4-丁三醇的途径优化 51 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn January 25, 2016, 32(1): 51−63 DOI: 10.13345/j.cjb.150126 ©2016 Chin J Biotech, All rights reserved 工业生物技术 1,2,4- 1* 2,3* 2 2 4 2 1 2 孙雷 ，杨帆 ，朱泰承 ，李兴华 ，孙红兵 ，李寅 ，许正宏 ，张延平 1 214122 2 100101 3 230022 4 300308 , , , . 1,2,4-. , 2016, 32(1): 51–63. Sun L, Yang F, Zhu TC, et al. Optimization of 1,2,4-butanetriol synthetic pathway in Escherichia coli . Chin J Biotech, 2016, 32(1): 51–63. 摘 要: 1,2,4-丁三醇 (BT) 是一种在工业中有多种用途的重要的非天然化合物。文中通过将外源基因 xdh 和 mdlC 导入大肠杆菌BW25113 表达，并敲除了xylA 、xylB 、yagE 、yjhH 、yiaE 和ycdW 等木糖和中间产物代谢 旁路基因，构建了能够将D-木糖转化为BT 的重组菌株。为优化BT 合成途径，针对BT 合成途径中的限速步 骤——3-脱氧-D-甘油- 戊酮糖酸的脱羧反应，进行了新酶的筛选和评价，获得了可显著提高反应效率的新的 2- 酮酸脱羧酶——KivD ，并构建了表达该酶的重组菌株BW-025 。在此基础上，通过初步条件优化，将BT 产 量提高至2.38 g/L ；进一步调节途径中各个酶的表达量，探究了它们对BW-025 合成BT 的影响，最终获得了 BT 产量较BW-025 提高了48.62% 的重组菌株BW-074 。 : D-木糖，1,2,4-丁三醇，大肠杆菌，2- 酮酸脱羧酶，途径优化 Received: March 25, 2015; Accepted: May 4, 2015 Supported by: The Knowledge Innovation Project of the Chinese Academy of Sciences (No. KSCX2-EW-G-5), Beijing Municipal Natural Science Foundation (No.. Corresponding authors: Zhenghong Xu. Tel/Fax: +86-510 E-mail: zhenghxu@ Yanping Zhang. Tel/Fax: +86-10 E-mail: zhangyp@ * These authors contributed equally to this study. (No. KSCX2-EW-G-5) (No. 52 ISSN 1000-3061 CN 11-1998/Q Chin J Biotech January 25, 2016 Vol.32 No.1 Optimization of 1,2,4-butanetriol synthetic pathway in Escherichia coli 1* 2,3*