饲料中沙丁胺醇的测定酶联免疫吸附法.pdfVIP

备案号：18619-2006 DB36 江 西 省 地 方 标 准 DB36/T 484—2005 饲料中沙丁胺醇的测定-酶联免疫吸附法 2005-12-25 发布 2006-02-01 实施 江西省质量技术监督局 发布 DB36/T 484—2005 目 次 前言 II 1 范围 1 2 方法原理 1 3 试剂和材料 1 4 仪器设备 1 5 样品的制备 1 6 分析步骤 1 7 结果计算 2 8 灵敏度 2 9 其他 2 I DB36/T 484—2005 前 言 本标准由江西省农业厅提出。 本标准起草单位：江西省兽药饲料监察所。 本标准起草人：文虹、周华娇、符金华、饶辉、尹腾桂、周伟良。 II DB36/T 484—2005 饲料中沙丁胺醇的测定-酶联免疫吸附法 1 范围 本标准规定了饲料中沙丁胺醇酶联免疫吸附测定（ELISA）方法。 本标准适用于配（混）合饲料、浓缩饲料、预混合饲料及饲料添加剂中沙丁胺醇的测定。 2 方法原理 利用固相酶联免疫吸附原理，将沙丁胺醇特异性抗体包被于聚苯乙烯微量反应板的孔穴中，再加入 稀释的样品（未知抗原）及酶标沙丁胺醇的抗原（已知抗原），使两者与抗体之间进行免疫竞争反应， 然后加酶底物显色，颜色的深浅取决于抗体和酶标沙丁胺醇抗原结合的量，即样品中沙丁胺醇多，则被 抗体结合酶标沙丁胺醇少，颜色浅，反之则深，用目测法或仪器法与沙丁胺醇标样比较来判断样品中沙 丁胺醇的含量。 3 试剂和材料 以下试剂除特别注明外均为分析纯，水为蒸馏水。 3.1 沙丁胺醇酶联免疫试剂盒 3.1.1 1×96 孔板(12 条×8 孔)包被有抗沙丁胺醇的 IgG 抗体 3.1.2 6×标准液，(2ml)为分别含 0，0.1，0.3，0.9，2.7，8.1ppb 的 SAL 溶液 3.1.3 1×SAL 过氧化物酶标记物浓缩溶液 1×酶反应底物 (7 ml)：含有过氧化尿素 1×显色剂 (7 ml)：四甲基联苯胺 1×反应停止液 (8 ml)：1N 盐酸 1×PBS (15 ml)：用于稀释SAL－过氧化物酶标记物浓缩溶液 1×PBST浓缩液 (40 ml)：加800mL蒸馏水稀释，洗板用 3.2 1mol/L 盐酸