专题7 小专题19 生物技术实践教学精品.pptVIP

专题七　 选修内容 ;1．微生物的实验室培养要点解读;划分标准;(2)消毒和灭菌的区别 ;(3)纯化大肠杆菌的原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这些单个的菌落就是一个个纯化的细菌菌落。;2．酵母细胞的固定化 (1)实验原理：①固定化酶不溶于反应液中，易于回收，可以重复使用。②固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定于一定空间内的技术。;(2)直接使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较;(3)制备固定化酵母细胞取得成功的关键 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，如果浓度过高，将很难形成凝胶珠，如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数量少，都会影响实验效果。溶化海藻酸钠时要用小火或间断加热，避免海藻酸钠发生焦糊。;3．五种重要物质的提取;(续表) ;(2)DNA粗提取与鉴定 ①哺乳动物成???的红细胞中不含细胞核，不适于作为 DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。 ②实验过程中两次用到蒸馏水：第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破，释放出DNA，第二次目的是稀释NaCl溶液。 ③鉴定DNA：加入二苯胺试剂并沸水浴加热，观察是否出现蓝色。;(3)血红蛋白的提取和分离操作程序 ①样品处理：红细胞的洗涤(除去血浆蛋白等杂质)、血红蛋白的释放(使红细胞破裂，血红蛋白释放出来)、分离血红蛋白溶液(经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来)。 ②粗分离——透析：除去样品中相对分子质量较小的杂质。 ③纯化：一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。 ④纯度鉴定：一般用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，来鉴定蛋白质的纯度。;(4)植物有效成分的提取方法 ①蒸馏法：芳香油具有挥发性，把含有芳香油的花、叶等放入水中加热，水蒸气能将挥发性较强的芳香油携带出来，形成油水混合物；冷却后，油水混合物又会重新分成油层和水层，除去水层便得到芳香油。 ②萃取法：需将植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸点的有机溶剂中，使芳香油或色素充分溶解，然后蒸发出低沸点的溶剂，剩下的就是芳香油或色素。 ③压榨法：橘子、柠檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量较多，可以用机械压力直接榨出，这种提取方法叫做压榨法。;一、几种传统发酵技术的比较;;二、植物组织培养技术 1．理论基础和基本过程 当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。基本过程如下：;(1)内因：不同的植物组织，培养的难易程度差别很大，容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养。同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短也有影响。幼龄、保存时间短的植物材料容易培养成功。菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 (2)外因：无菌、营养物质、植物激素(注意使用的先后顺序)和环境因子(pH、温度、光照)等。;【热点考向1】细菌培养的有关技术 【例1】(2011·全国新课标)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题： (1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以____为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于____培养基。 (2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即__________和____________。 ;(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力___。 (4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和_________ 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_____附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。;【解析】 (1)题中想筛选分解原油的菌株，应该以原油为唯一的碳源。培养基分为选择培养基和鉴别培养基，本题是筛选菌株，属于选择培养基。 (2)接种方法分为平板划线法和稀释涂布平板法。 (3)菌株的分解能力越强，分解的原油越多，则分解圈越大。 (4)微生物实验要求在无菌环境中操作，灭菌方法包括灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。;【变式1】(2011·湖南师大附中模拟)伴随着生命科学的新突破，现代生物技术已经广泛地应用于工业、农牧业、医药、环保等众多领域，产生了巨大的经济和社会效益。请回答下列生物技术方面的问题： (1)工业生产上通常采用微生物发酵技术获得果胶酶，选用的微生物通常是_________，在提取细胞内的酶时，先将组织细胞________________　制取粗酶液，再进一步获得相应的酶。 (2)微生物一般来自土壤，在平板培养基上分离纯化细菌常用的接种方法是___________和_____ _________等。; (3)微生物在果酒、果醋、