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- 2019-03-27 发布于安徽
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实用标准文案
文档
CFX96 实时荧光定量PCR仪操作流程及注意事项
开始运行仪器
打开电脑
打开定量PCR仪底座开关
启动CFX Manager软件
?放置样品
将PCR反应体系加入到0.2ml低缘八联管,盖上管盖;或加入低缘96孔板,用光学级封膜封好。注意,必须带一次性塑料手套,不要让手指接触到反应管表面。将反应管按顺序放入仪器的加热孔中。??
?设置程序,运行实验
定量PCR软件操作基本步骤为:a. 设置热循环程序文件(Protocol Tab)?? b.设置反应板文件(Plate Tab)。 C.点击“Start Run”键,运行程序热循环程序文件(Protocol Tab)设置指南:点击Edit(编辑)或 Create New(创建新程序)。
反应板设置文件(Plate Tab)设置指南:选择本次实验所要使用的荧光染料种类;单击样品类型;如要某些反应孔第一荧光染料对应的样品类型为标准品(Standard),点击“Dilution Series”键可设置其标准品浓度及稀释倍数。
点击“Start Run”键。单击open lid(打开热盖)或Close lid(关闭热盖)放置样品;单击Start Run,保存文件,开始运行程序。
?结果分析
PCR反应结束后,软件会自动计算标准曲线和Ct值等。
如需进行表达量分析、等位基因分析等, 在软件窗口选择相应分析功能。
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