受条锈菌诱导的小麦丝氨酸苏氨酸激酶基因 TaS／TK的克隆与表达.pdfVIP

江苏农业学报（ＪｉａｎｇｓｕＪ．ｏｆ Ａｇｒ．Ｓｃｉ．），２０１６，３２（５）：９８０～９８６ ９８０ ｈｔｔｐ：／ ／ ｗｗｗ．ｊｓｎｙｘｂ．ｃｏｍ 蒋正宁，别同德，赵仁惠，等． 受条锈菌诱导的小麦丝氨酸苏氨酸激酶基因ＴａＳ／ ＴＫ 的克隆与表达［Ｊ］．江苏农业学报，２０１６，３２ （５）：９８０⁃９８６． ｄｏｉ：１０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１０００⁃４４４０．２０１６．０５．００４ 受条锈菌诱导的小麦丝氨酸苏氨酸激酶基因ＴａＳ／ ＴＫ 的克隆与表达 蒋正宁，　 别同德，　 赵仁惠，　 高德荣，　 吴旭江，　 张伯桥 （江苏里下河地区农业科学研究所／ 农业部长江中下游小麦生物与遗传改良重点实验室，江苏 扬州 ２２５００７） 　 　 摘要：　 以小麦基因芯片数据获得的１个受条锈病菌诱导上调表达的ＥＳＴ序列为探针，从小麦中克隆抗条锈 病相关基因ＴａＳ／ ＴＫ，并对其序列特征、进化关系和表达特征进行分析。 结果表明：ＴａＳ／ ＴＫ 基因ｃＤＮＡ 全长为 １５８２ ｂｐ，包含１２３９ ｂｐ的ＯＲＦ、１３９ ｂｐ 的５′ＵＴＲ以及２４０ ｂｐ 的３′ＵＴＲ，编码４１２个氨基酸，分子量４７ １２０，等电点为 ５８４，并将其定位于小麦５Ｂ染色体；ＳＭＡＲＴ软件分析结果表明ＴａＳ／ ＴＫ仅存在 １个典型的丝氨酸／ 苏氨酸蛋白激 酶结构域；经激酶区Ｂｌａｓｔｐ 比对分析，ＴａＳ／ ＴＫ与其他植物同源性较低，与同源性最高的短柄草仅为５９％；ｑＲＴ⁃ＰＣＲ 检测结果显示，ＴａＳ／ ＴＫ在小麦茎、叶中均有表达，但在根中低水平表达；ＴａＳ／ ＴＫ在抗病小麦、感病小麦中均受条锈 菌诱导表达，但在抗病材料中表达水平明显高于感病材料；同时，ＴａＳ／ ＴＫ 受水杨酸诱导上调表达。 以上结果表明 ＴａＳ／ ＴＫ可能参与小麦ＳＡ信号通路中对条锈病菌的抗性反应。 关键词：　 小麦； 条锈病； 丝氨酸苏氨酸激酶基因； 实时定量ＰＣＲ 中图分类号：　 Ｓ５１２１　 　 　 文献标识码：　 Ａ　 　 　 文章编号：　 １０００⁃４４４０（２０１６）０５⁃０９８０⁃０７ Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａ Ｓｅｒｉｎｅ／ Ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ ｇｅｎｅ ＴａＳ／ ＴＫ ｉｎ ｗｈｅａｔ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｓｔｒｉｐｅ ｒｕｓｔ ｆｕｎｇａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ＪＩＡＮＧＺｈｅｎｇ⁃ｎｉｎｇ，　 ＢＩＥ Ｔｏｎｇ⁃ｄｅ，　 ＺＨＡＯ Ｒｅｎ⁃ｈｕｉ，　 ＧＡＯ Ｄｅ⁃ｒｏｎｇ，　 ＷＵ Ｘｕ⁃ｊｉａｎｇ，　 ＺＨＡＮＧ Ｂｏ⁃ｑｉａｏ （ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ ＷｈｅａｔＢｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ＧｅｎｅｔｉｃＩｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｎＬｏｗ ＆Ｍｉｄｄｌｅ ＹａｎｇｔｚｅＲｉｖｅｒ Ｖａｌｌｅｙ Ｗｉｎｔｅｒ ＷｈｅａｔＲｅｇｉｏｎ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ／ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅＬｉｘｉａｈｅ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ ｉｎ ＪｉａｎｇｓｕＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ ２２５００７，Ｃｈｉｎａ） 　 　 Ａｂｓｔｒａｃｔ：　 Ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ，ｕｓｉｎｇ ａｎｕｐ⁃ｒｅｇｕｌａｔｅｄＥＳＴ ｓｃｒｅｅｎｅｄｂｙ ｇｅｎｅ ｃｈｉｐ ａｓｐｒｏｂｅ，ａ ｓｔｒｉｐｅｒｕｓｔ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ⁃ｒｅｌａｔｅｄ ｇｅｎｅ ＴａＳ／ ＴＫ ｗａｓ ｃｌｏｎｅｄｆｒｏｍｗｈｅａｔ，ａｎｄｔｈｅｇｅｎｅｓｅｑｕｅｎｃｅｆｅａｔｕｒｅｓ，ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓ⁃ ｔｉｃｓｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ． Ｔｈｅｆｕｌｌ⁃ｌｅｎｇｔｈ ｃＤＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ＴａＳ／ ＴＫ ｉｓ １５８２ ｂｐ ｉｎ ｌｅｎｇｔｈ，ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ａ １２３９⁃ｂｐ