课件:第七章蛋白质检验.ppt
* * 评价: 优点:简便,准确,重复性好,10g-120g/L线性好,特异性与精密度好,批内CV%<2%,显色稳定。 缺点:灵敏度较差,对蛋白质含量低的体液标本不适合。 应用:常规推荐方法。手工或上机使用。 * 3.酚试剂法 原理: 蛋白质分子中的酪氨酸残基和色氨酸残基能够和酚试剂中的磷钨酸-磷钼酸反应生成蓝色化合物。 Lowry改良法:在酚试剂中加入Cu2+(75%呈色),提高了呈色的灵敏度,为双缩脲法的100倍左右。 * 评价及应用: 优点:操作简单,改良法灵敏度高(10μg-60μg),适合测定蛋白含量少的标本。 缺点:各种蛋白质酪氨酸和色氨酸比例不同,只适合测定单一蛋白质。受一些药物干扰。 * 4.比浊法 原理: 评价及应用: 优点:简便不需特殊仪器。 缺点:浊度形成的干扰因素多(加试剂方法,反应温度,蛋白絮状沉淀等) 某些酸类(磺基水杨酸等)和血清蛋白质结合产生沉淀,测其浊度,与标准对比,可求蛋白含量。 * 5.染料结合法 在酸性环境下,带正电的蛋白质(-NH3+)与染料的阴离子产生颜色反应,使染料的吸收峰改变,可既而用分光光度法比色测定。 原理: 常用染料:氨基黑,考马斯亮蓝等 评价及应用: 优点:操作简便,重复性好,灵敏
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