产1,3-丙二醇新型基因工程菌的构建.PDFVIP

2009 15 5 ): 708~712 2009-10-25 应用与环境生物学报 ， ( Chin J Appl Environ Biol=ISSN 1006-687X DOI: 10.3724/SP.J.1145.2009.00708 产1,3-丙二醇新型基因工程菌的构建* ** 方慧英 张 成 诸葛斌 诸葛健 （江南大学工业生物技术教育部重点实验室，工业微生物研究中心 无锡 214122） 摘 要 以甘油为底物转化生产 1,3-丙二醇的生物合成途径中，往往由于还原力NADH 的不足，限制了1,3-丙二醇的合 成，引起中间代谢产物 3-羟基丙醛累积，进而抑制甘油脱水酶的活性，阻碍菌体的生长，严重影响 1,3-丙二醇的合成 途径 . 为了解决合成途径中还原力不足这一主要矛盾，本文以大肠杆菌和克雷伯氏菌染色体DNA为模板克隆得到yqh D 和dhaB、dhaT基因，构建双启动子表达载体pEtac-dhaB-tac-yqh D及表达载体pUC-tac-dhaT，成功共转入E. coli JM109， 得到可利用两种辅酶（NADH、NADPH ）将甘油转化为1,3-丙二醇且传代稳定的重组大肠杆菌双质粒系统，发酵结果 表明，1,3-丙二醇产量提高了28.6%. 图6 表 1 参 17 关键词 1,3-丙二醇；3-羟基丙醛; 重组大肠杆菌；共表达；甘油 CLC TQ923 : Q78 Construction of Novel Recombinant Strains Capable of Producing 1,3-propanediol* FANG Huiying, ZHANG Cheng, ZHUGE Bin** ZHUGE Jian (Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Research Center of Industrial Microorganisms Wuxi 214122, Jiangsu, China) + Abstract BiBi��synthesissynthesis ������ 1,3-p1,3-p����panepane��ii������ (1,3- PD)(1,3- PD) ������������ gg��yce��yce�������� neenee��ss NADH as a cNADH as a c��enen��y��ey��e tt�� pp������ii��ee HH . Deficiency of NADH causes the accu��u��ati�n ��� inte���e�iate ��etab���ite 3-hy���xyp��pi�na���ehy�e an� inhibits the acti�ity ��� g��yce���� �ehy��atase, which has the ��u�the� negati�e e����ect �n bi�synthesis ��� 1,3-p��pane�i��� an� ce���� g��wth. T� �es����e this