透明质酸的研究现状【文献综述】 1.docVIP

毕业论文文献综述 食品质量与安全 透明质酸的研究现状 摘要： 透明质酸是生物体内普遍存在的酸性黏多糖，具有独特的黏弹性、生物相容性及非免疫原性，在生命科学、食品行业以及医学领域都有较为广泛的应用，本文主要对透明质酸的生产、提取、分离纯化、降解方法等方面进行综述。 关键词：透明质酸；提取；纯化；HA降解 透明质酸简介 透明质酸是一种由D-N-乙酰氨基葡萄糖和D-葡萄糖醛酸为结构单元的高分子粘多糖[2]，而且透明质酸无致炎性及抗原性，是理想的“粘性手术”材料，对眼科、骨科手术的完成和康复起重要作用[3]，所以被广泛应用于化妆品、医药等方面。但是E. Gura[27]和T. Miyazaki*[28]等人的研究表明，透明质酸的构想受温度、pH、外界机械剪应力以及盐浓度的影响，因此在获得相对分子量分布带比较窄的的透明质酸时需要控制好各个实验条件。 透明质酸广泛分布于各种动物组织中，而且不同的动物组织中得到的与细菌发酵得到得透明质酸无种属差异[4]。迄今为止，已在很多动物结缔组织以及动物眼玻璃体等组织中已分离得到HA。 目前所了解的制备透明质酸的方法主要有两种，一种是从动物组织中提取，一种是从微生物发酵液中提取[5]。国内大多从鸡冠以及动物眼球等组织中提取透明质酸。但是动物组织提取法所得的HA的纯度相对不是很高，而且生产效率低、成本高，其原料来源也受限制。虽然该法有很多缺陷，但它仍然是现今生产医学用HA主要的方法[6]。 透明质酸研究现状 2.1　透明质酸的提取 HA制备的方法目前主要有组织提取法、细菌发酵法和人工合成法。 　　组织提取法工艺流程比较简单，获得的HA分子量也较大，一般都大于60万，且其粘度高，保湿性能好。透明质酸在动物组织中的分布广泛，几乎所有的动物组织中均含有透明质酸，只是含量不同。已从下列组织中分离出了透明质酸：结缔组织、脐带、皮肤、人血清、鸡冠、关节滑液、脑、软骨、眼玻璃体、人尿、鸡胚、兔卵细胞、动脉和静脉等，但考虑到原料透明质酸含量的高低、数量的多少和的程度等因素，能够生产的原料主要为鸡冠、人脐带和动物眼球[7～8]。 [9]采用水提醇沉等电点法脱蛋白质与超滤相结合的加工工艺，运用正交实验法对提取工艺参数进行优化制备的透明质酸为白色粉末，得率为 2.96% [10—12], 再用两种或两种以上的酶水解, 能有效地提高粘多糖的得率。所得的多糖提取液有的因粘稠，常常用离心法除去不溶物。郭育涛[13]，赵玉红[14]等人用胰蛋白酶水解动物组织，得到纯度较好的HA；汪建等[15]人采用粗胰蛋白酶水解鸡冠，并分批次加入酶，水解效果较好。此外常见的水解酶还有木瓜蛋白酶、 胃蛋白酶、和链霉菌蛋白酶等。 　　酶法脱蛋白效果较好，损失率低，但酶解强度不宜过大、时间不宜过长，否则易使太多多糖-蛋白质的复合物分解，造成某些多糖-蛋白质复合物特有的生理活性降低[16,17]。 细菌发酵法是利用某些种属的链球菌，在生长繁殖过程中，向胞外分泌以透明质酸为主要成分的荚膜。细菌发酵法与动物组织提法相比，具有生产规模不受动物原料限制，发酵液中透明质酸以游离状态存在,易于分离纯化，成本低，易于形成规模化工业生产，无动物来源的致病病毒污染的危险等优点透明质酸无种属差异，不同动物组织提取的及不同菌种发酵生产的透明质酸，在化学本质和分子结构上是一致的，只是相对分子质量（Ｍr）有差别。 [19]通过天然酶聚合反应，人工合成出了用途广泛的 HA。使用多糖类聚合物合成“透明质酸氧氨杂环戊烯衍生物”，然后添加水解酶产出衍生物和酶的复合体，再清除反应液中的酶合成 HA。据报道，人工合成的 HA与天然品在质量上没有差别。诺维信与美国的 Hyalose LLC公司在进行利用带有 HA遗传信息的基因植入微生物体内，进行HA 生产的研究。以上两种方法处于研究阶段,若能实现规模化生产 HA，为人类社会提供质优价廉的产品,将是 HA行业的一场革命[20]。 2.3 透明质酸纯化 通过查找文献可知，分离纯化透明质酸的方法有：酶分解结合季铵盐法、季铵盐法、酶分解与树脂交换法、离子交换层析法 、芳香树脂和活性炭法、电—膜分离法、超滤法、季铵盐-DEAE -凝胶过滤法等。不过从动物组织中分离纯化透明质酸，纯化中使用季铵盐的话不但操作过程复杂，而且透明质酸损失比较大；芳香树脂和活性炭法的 HA损失也比较大；电-膜分离方法纯化程度有限；离子交换法操作不稳定，不容易实现工业化生产操作。 张谦朋等[21]采取了DEAE一纤维素柱层析法和蛋白水解酶降解法处理样品，分别对鸡冠和脐带GAG中的蛋白部分处理，再利用各种GAG和季铵盐(如氯代十六烷基吡啶）生成的复合物在氯化钠溶液中解离所需的临界盐浓度不同而将所得的GAG复合物分级分离。已知透明质酸氯代十六烷基吡啶复合