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生物技术在水产遗传育种中的研究进展与应用前景 生物技术在水产遗传育种中的研究进展与应用前景 摘要：本文综述了生物技术在水产遗传育种中的应用与研究,包括人工雌核生 摘要 殖和雄核生殖, 多倍体诱导, 细胞核移植, 细胞和组织培养, 细胞融合和基因工 程等。 关键词 生物技术；遗传育种；水产动物；应用 1 引言 生物技术是指人们运用现代生物学、工程学和其它基础学科的知识, 按照预 先的设计对生物进行控制和改造或模拟生物及其功能, 用来发展商业性加工、产 品生产和社会服务的新兴技术领域。 近十几年来, 生物技术迅猛发展, 方兴未艾。 本文就人工雌核生殖和雄核生殖、多倍体育种、 细胞核移植、细胞和组织 培养、细胞融合和基因工程在水产遗传育种方面的研究进展作一综述。 2 人工雌核生殖和雄核生殖 2.1 雌核生殖 雌核生殖是指卵子依靠自己的细胞核发育成个体的生殖行为。自然界存在这 种单性生殖的水生动物, 人工诱发手段也可使未受精卵进行雌核生殖, 但产生的 个体绝大多数是单倍体, 难以存活, 需紧接着二倍化的特殊处理。诱发雌核发育 除了可以加快建立选育系和控制性别外, 还可以使一些稀有的隐性等位基因显 现而产生新的优良胜状, 使具有重要经济性状的显性基因转为纯合状态, 雌核发 育后代还可用来鉴定鱼类的近交衰退现象等。 常用诱发雌核生殖的方法有射线照 射、化学药品处理、带血玻璃针激活以及杂交(异质精子穿入卵但精核不参于发 育)等。二倍化的方法通常使用温差(冷或热休克) 、水静压、药品（如秋水仙素 和细胞松驰素 B (简称 C S) ）处理等。 我国蒋一硅等[1]和吴清江等[2] 曾分别成功地应用了 y 射线辐射鱼类精液后 诱导红螂鱼卵和鲤鱼卵的雌核生殖。 在对虾方面的研究, 蔡难儿[3] 首先报道了采 用与研究鱼类人工诱导雌核发育相类似的四步诱导法对中国对虾进行人工诱导 雌核发育, 育出三批雌核发育的个体但要大规模生产仍存在一定的困难。 2.2 雄核生殖 雄核生殖是指卵子只依靠雄性原核进行发育的生殖方式。 人工雄核生殖同人 工雌核生殖一样, 也要经过诱发雄核生殖并使之二倍化的两个步骤。目前诱发方 法有去除卵核、射线破坏卵核、杂交和用过熟或老化的卵子受精等。 刘汉勤等[4] 用类似方法使泥鳅精子与大鳞副泥鳅卵子授精后挑去雌核从而 获得泥鳅雄核生殖单倍体。 叶玉珍等[5] 也用了射线处理鲤、 鲤鱼类成熟卵, 获得 了二倍体雄核发育鱼苗。另外, 许多研究证明不同种类的杂交可以产生雄核生 殖。水产生物的雄核单倍体难以存活, 须在发育早期二倍化。 3 多倍体育种 三倍体生物由于节省了繁育后代所需的能量消耗, 故生长个体大, 因此海产 动物三倍体育种是应用生物技术提高海产品产量的有效途径。 我国最早开展虾类 [6] 多倍体育种是在1989 年6 ~ 12 月, 相建海 以锐脊单肢虾( Sicyonia ingentis) 为材料在国际上首次获得对虾三倍体幼体。 该成果备受国内外学者的 关注。 近年中国科学院海洋研究所在对虾三倍体和四倍体研究中又取得进展, 经 过条件的优化, 中国对虾三倍体的最高诱导率可达90% 以上; 在胚胎期检验, 四倍体最高诱导率达90%以上。 大连水产学院王子臣早在1986 年就开始对鲍鱼三倍体进行研究。近期他们 在前期工作的基础上, 使北方皱纹盘鲍和南方九孔鲍增加染色体数量形成三倍 体, 使稚鲍的成活率提高一倍, 生长周期缩短了三分之一, 此项技术产业化后 已累计生产三倍体鲍400 多万枚, 首次实现了鲍三倍体的规模化生产。 4 细胞核移植技术 这是一种将细胞核移植到另一细胞的细胞质中的生物技术, 是 50 年代初由 美国学者 Briggs 和 King 首创的[7] 。他们以豹蛙为材料, 将囊胚期的动物极细 胞核移入另一去核的卵子中, 获得正常发育的胚胎, 引起了国际上的重视。而后 这一技术广泛地应用于细胞分化、核质关系和发育机理等重大生物学问题的研 究。1961 年童第周率先在金鱼和鱼旁鱼皮鱼中进行同种鱼的细胞核移植[8] , 证 明细胞核移植也可以在鱼类中进行。之后, 童第周等在这两种鱼间进行亚科之间 的细胞核移植, 获得多种核质杂种鱼, 严绍颐等将鲤鱼胚细胞核移植到鲫鱼去核 卵中, 获得的核质杂交鱼具有较高的养殖价值[ 9] 。谢忠明等以鲤鲫移核鱼二代 为父本, 黑龙江散鳞镜鲤为母本, 经常规有性杂交获得第 1 代杂交种颖鲤, 已在 20 个省、市、自治区推广养殖[10] 。细胞核移植已在水产生物的遗传育种中发挥 重要作用, 但仅局限于鱼类和两栖类, 对于虾、蟹、贝、藻类还一无所知。另外, 并非所有核质杂交种都可以培育成新品种, 也不是所有的核质杂交种都有受体 物种的性状, 如鲫鱼细胞核和鲤鱼细胞质配合的杂种鱼基本上