HPLC法测定红芪中黄芪甲苷的含量.pdfVIP

◎ DSITANCED远UCAT翟OIfIO墩FC摩 第209I卷i年第O137期月总上··第半1月17刊期 HPLC法测定红芪中黄芪甲苷的含量 王玉霞 金晓玲 摘要：目的 建立用高效液相色谱法测定红芪中黄芪甲苷含量的检测方法。方法 以甲醇一水 (68：32)为流动相，于 200nm 波长处，以 外标法测定。结果 红芪中黄芪甲苷的量在 3．704~14．816~g范围内，浓度与峰面积线性关系良好 (FO．9994)，平均回收率为98．83％。结论 本 方法灵敏、准确、快速。 关键词：红芪；黄芪 甲苷；高效液相色谱法 doi：lO．3969~．issn．1672-2779．2011．13．095 文章编号：1672—2779(2011)一13—0140—02 红芪为豆科植物多序岩黄芪 (Hedysaturnpolybolrys 1．5．3 供试品的制备 取本品粉碎成细粉，精密称取 Hahd-Mazz)的干燥根，为常用中药。红芪其性温 ，味 4．0239g，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再 甘，归肺、脾经。具有补气固表，利尿托毒，排脓，敛 加甲醇适量，回流 4h，提取液回收甲醇并浓缩至干，残 疮生肌之功效。常用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷 渣加水 lOml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取 等症 l【】。因其性味与归经，功能与主治均与黄芪相同， 4次，每次40ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取 2 故历代本草都把红芪作为黄芪的一个品种收载在黄芪项 次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水溶 下。我国南北朝时期著名医药学家陶弘景在论述黄芪时 解，定溶 lOml容量瓶中。 就有 “又有赤色者，可作膏贴，俗方多用，道家不须” 1．5．4 测定法 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液 [】的记载。 《中国药典》(1977年版)一部首次把红芪作 各 10ul注入液相色谱仪，测定，如图1～2。 为一个品种来源收载在黄芪项下。《中国药典》(1985年 版)一部始把红芪与黄芪分列，单独收载。而现行的 《中 国药典》(2010年版)一部，对红芪的药材质量仅以鉴 别和浸出物来控制，显然不能系统完整地反映红芪的内 在质量。为了有效地控制红芪药材的质量，我们尝试应 用高效液相色谱法对红芪中黄芪甲苷的含量进行测定， 图 1 图2 通过实验证明该方法准确可靠，重现性好，能较好地控 2 结果 制红芪药材的质量。 2．1 标准曲线与线性关系考察 精密量取黄芪甲苷对 1 材料与方法 ， 照品溶液每ml含 0．3704mg溶液，分别取 1Oral、2Oral、 1．1 仪器 高效液相色谱仪 (日本岛津 LC--2010型， 25ml、30ml、35ml、40ml溶液，测定其峰面积，以黄芪 LC．solution工作站)，L一160DTP分析天平 (上海精密 甲苷为横坐标，测定峰面积的均值为纵坐标，绘制标准 仪器厂)。 曲线，计算回归方程y=51119X+25046，R=0．9994。结 1．2 试药 重蒸馏水，色谱 甲醇，其他试剂均为分析纯。 果表明：黄芪 甲苷的量在 3．704~14．8161,tg的范围内与所 1-3 对照品 黄芪 甲苷对照品 (供含量测定用，由中国 测得的相应的峰面积呈良好的线性关系。因该标准曲线 药品生物制品鉴定所提供。(批号：0726--200612)。 不过原点，样品采取外标两点法计算。 1．4 供试品 购 自毫州市中药材市场。 2．2 精密度与范围 精密吸取对照品溶液 (0．3704mg／ 1．5 定量分析 m1)15、25、351,tl，每个浓度进样 3次，测量其峰面积 1．5．1 色谱条件与系统适用性试