开题报告-紫外线诱变改善酵母菌细胞表面性质研究.docVIP

开题报告-紫外线诱变改善酵母菌细胞表面性质研究.doc

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毕业论文开题报告 环境工程 紫外线诱变改善酵母菌细胞表面性质研究 一、选题的背景与意义 紫外线是常用的物理诱变因子, 是诱发微生物突变的一种非常有用的工具。DNA和RNA的嘌呤和嘧啶有很强的紫外光吸收能力,最大的吸收峰在260nm。紫外辐射能作用于DNA ,因此在260nm的紫外辐射是最有效的致死剂。对于紫外的作用已有多种解释,但研究的比较清楚的一个作用是使DNA分子形成嘧啶二聚体,即两个相邻的嘧啶共价连接[。二聚体出现会减弱双键间氢键的作用,并引起双链结构扭曲变形,阻碍碱基间的正常配对,从而有可能引起突变或死亡。二聚体的形成,会妨碍双链的解开,因而影响DNA的复制和转录。紫外辐射可以引起转换、颠换、移码突变或缺失等。 日本于20世纪70年代就有人进行了利用酵母茵处理废水的探索性研究。并于90年代成功地实现了酵母茵废水处理技术的工程应用。日本一制油厂利用酵母处理高含油废水,对于平均含油量达11900mg/L的废水,除油率可达99%。此外,通过在反应器中接入功能菌株能增加目标底物的降解,降低其毒性。同时也可以缩短降解时间,酵母已被成功应用于处理高浓度含油废水以及石油的脱蜡等。然而,在酵母菌处理废水的实际运行中,酵母菌对废水的处理效果往往受到其表面性质的影响而不够理想。因此,可利用紫外诱变得到疏水性好、乳化能力强、絮凝性好的酵母菌菌株,并进行连续培养得到遗传性状稳定的菌株。从而使酵母菌对废水中COD的去除率提高。 二、研究的基本内容与拟解决的主要问题: 基本内容: 1. 综述紫外诱变育种(微生物)的方法和技术路线; 2. 设计实验,诱变酵母菌细胞; 3. 考察诱变后酵母细胞表面性质的变化;细胞表面性质:疏水性、絮凝性、乳化能力等; 4. 筛选对于废水处理有益的诱变菌株,主要是COD降解能力高、絮凝性好等特点。 拟解决的主要问题: 通过紫外线照射酵母菌对其进行诱变,再以相应的分析方法分析诱变所得菌株的疏水性、絮凝性以及乳化能力,筛选出COD降解能力强、絮凝性好的对废水处理有益的酵母菌菌株。 三、研究的方法与技术路线: 技术路线: ①构建紫外诱变酵母菌实验台,对培养所得的酵母菌进行紫外诱变。 ②建立对诱变所得的酵母菌菌株进行表面性质的定性定量分析方法,主要分析酵母菌的疏水性、 絮凝性和乳化能力。 ③根据上述定性定量所得结果,筛选出有益于废水处理的酵母菌菌株。 2、实验部分: 2.1主要仪器 紫外线照射灯,恒温振荡器,超净工作台。 2.2收集菌种 配制YPD液体培养基,用无菌接种环将热带假丝酵母(Candida tropicalis)菌株接入YPD培养基中,将接种后的YPD培养基封口,移至恒温振荡器中于温度28℃,175rpm连续培养48小时后取出,然后收集菌体。 2.3实验步骤 先将紫外线照射灯打开预照射20min,再将培养所得的酵母菌放到超净工作台中紫外线下30cm处照射,照射时间在20-40s之间。再对诱变菌株进行表面性质定性定量分析,最后筛选出表面性质优良的菌株进行连续培养。 3、结果分析 根据相关的定性定量方法,分析并筛选出疏水性好、絮凝性好、乳化能力强的酵母菌菌株,此类酵母菌有益于废水中有机物的降解去除 四、研究的总体安排与进度: 2010.11.01-2009.11.10 选题; 2010.11.26-2010.12.15 收集整理资料,完成开题报告、文献综述;开题; 2010.12.16-2011.04.10 翻译相关英文资料,依据大纲开展实验工作; 2011.04.11-2011.04. 20 完成论文初稿交由老师审阅; 2011.04.21-2011.05.06 完成论文二稿交由老师审阅; 2011.05.07-2010.05.12 定稿,准备答辩相关材料; 2011.05.13 答辩。 五、主要参考文献: [1] Madigan ,M. T(美) Martinko J.M(美),Parker,J.(美).微生物生物学[M].北京:科学出版社, 2001 :390. [2] 曹友声, 刘仲敏.现代工业微生物学[M].长沙:湖南科学技术出版社,1998. [3] ChigusaK,et al Treatment ofwastewatorfrom oilman ufacturingplant by yeast [J].War SciTech, 1996,34(11):5l-58. [4] Baker,B H,Herson,D S.Bi0remediation [J].54(1):305—315 ·McGraw—Hill,1994,PP 1-25.193-195

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