光谱法研究Se的分析及Se存在下药物与血清白蛋白的相互作用-分析化学专业论文.docxVIP

摘 要 摘 要 本文用荧光光谱法测定样品中的硒，荧光光谱法结合紫外光谱法研究了硒的存在下 激素药物与血清白蛋白的相互作用的荧光猝灭常数、结合常数、作用力、结合位置以及 构象变化。本论文分为四章。 第一章：概述了硒的重要性及检测方法，分子荧光谱的原理及应用，分子光谱法研 究药物与血清白蛋白相互作用的研究内容。 3第二章：样品经微波消解，在酸性条件下，硒(Ⅳ)氧化碘化钾，其反应产物 I- 与罗 3 丹明 B 形成离子缔合物。离子缔合物被 1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐(C4MIM)PF6 萃取 进入离子液体相。荧光猝灭值与硒(Ⅳ)的浓度成正比。该方法具有操作简易、无污染、 灵敏度高等优点，可用于富硒保健品和食盐中微量硒的测定。 第三章：在模拟生理条件，荧光光谱法结合紫外光谱法研究了己烯雌酚(DES)与牛 血清白蛋白(BSA)的相互作用以及硒、镉对己烯雌酚与牛血清白蛋白相互作用影响。测 定了不同温度下 BSA-DES 体系的的荧光猝灭常数、结合常数和热力学参数。根据 F?ster 偶极-偶极非辐射能量转移机理计算 BSA 和 DES 间的结合距离为 3.65 nm。己烯雌酚对 BSA 内源性荧光的猝灭机理为静态猝灭。△H0、△S0 表明 DES 与 BSA 之间的作用 力主要为氢键和范德华力。BSA 分子中的色氨基酸残基主要参与与 DES 起结合反应。 华法令、布洛芬、地高辛作为特异性探针所做的竞争实验表明与 DES 的主要结合位点 位于 BSA 亚结构域 IIIA 的位点 III。此外，在 Cd(II)的存在下 DES 与 BSA 的相互作用减 少了四个数量级。 第四章：在模拟生理条件下，用荧光光谱结合紫外可见光谱技术研究炔诺酮(NET) 与牛血清白蛋白(BSA)的相互反应特征，以及硒、镉离子对 NET 与 BSA 相互作用的影 响。测定了不同温度下 NET-BSA 体系的猝灭速率常数、结合常数和热力学参数。通过 Stern-Volmer 方程探讨了 NET 对 BSA 的猝灭机理，表明 NET 使 BSA 内源性荧光发生 猝灭。结果表明结合中主要作用力为范德华力和氢键。竞争实验表明 NET 的主要结合 位点为 BSA 的亚结构域 IIA 的位点 I。根据 F?ster 偶极一偶极非辐射能量转移机理计算 BSA 和 NET 间的结合距离为 3.23 nm。并且用同步荧光法和三维荧光光谱研究了在硒、 镉离子和 NET 的存在下 BSA 构象变化。 I 摘 要 关键词 荧光猝灭 硒 牛血清白蛋白 己烯雌酚 炔诺酮 相互作用 II PAGE PAGE IV Abstract Abstract In this paper, the methods for determination of selenium by fluorescence spectrometry were developed. The interaction between hormone drugs and serum albumin was studied in the presence of selenium by fluorescence spectroscopy combined with UV-Vis spectrophotometric. The fluorescence quenching rate constants, binding constants, thermodynamic parameters, binging site and conformational change for system were determined. This paper includes four chapters: Chapter one: The article summarizes the importance and the test methods of selenium， introduces the principles and the applications of fluorescence spectroscopy. The contens of interaction between medicine and serum albumin by fluorescence spectroscopy were reviewed. Chapter two: Sample was digested by microwave. Potassium iodide is oxidized by Se(Ⅳ) 3in medium of diluted acid, the product I- 3  reacts with Rhodamine B