固体支撑脂质双层膜与β-淀粉样蛋白相互作用的研究-光学工程专业论文.docxVIP

Interaction of the Supported Planar Lipid Bilayer and the Amyloid-β A Dissertation Submitted to the Graduate School of Henan University in Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Master of Science By Hu Zhiping Supervisor：Prof. Mao Yanli May, 2015 关于学位论文独创声明和学术诚信承诺 本人向河南大学提出硕士学位申请。本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下 独立完成的，对所研究的课题有新的见解。据我所知，除文中特别加以说明、标注和致谢的地方外， 论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括其他人为获得任何教育、科研机构的 学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确 的说明并表示了谢意。 在此本人郑重承诺：所呈交的学位论文不存在舞弊作伪行为，文责自负。 学位申请人（学位论文作者）签名： 2015 年 月 日 关于学位论文著作权使用授权书 本人经河南大学审核批准授予硕士学位。作为学位论文的作者，本人完全了解并同意河南大学 有关保留、使用学位论文的要求，即河南大学有权向国家图书馆、科研信息机构、数据收集机构和 本校图书馆等提供学位论文（纸质文本和电子文本）以供公众检索、查阅。本人授权河南大学出于 宣扬、展览学校学术发展和进行学术交流等目的，可以采取影印、缩印、扫描和拷贝等复制手段保 存、汇编学位论文（纸质文本和电子文本）。 （涉及保密内容的学位论文在解密后适用本授权书） 学位获得者（学位论文作者）签名： 2015 年 月 日 学位论文指导教师签名： 2015 年 月 日 I I PAGE PAGE IV 摘 要 老年痴呆症，也叫阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)， HYPERLINK /wiki/%E7%A5%9E%E7%BB%8F 是最常见的神经性功能 障碍疾病。目前，患 AD 的人数逐渐增加。许多研究表明 AD 的发病基因主要是淀粉样 蛋白质-beta(Aβ)聚集后沉积在大脑边缘和大脑皮层形成淀粉样蛋白斑。Aβ 蛋白是由淀 粉样前体蛋白(APP)经 β-和 γ- HYPERLINK /view/3851578.htm 分泌酶的蛋白水解作用而产生 HYPERLINK /view/83652.htm 多肽，其中 Aβ(1-40)和 Aβ(1-42)是两种最为常见的类型。许多研究表明 Aβ 的聚集和纤维化发生在含单唾液酸 四己糖神经节苷脂（GM1）的脂质膜上，神经系统中含量丰富的 GM1 在 Aβ 蛋白的聚 集和纤维化过程中起到至关重要的作用。 固体支撑脂质双层膜作为细胞膜模拟体系，被广泛应用于研究脂质-蛋白质和细胞- 细胞相互作用。它们在医疗移植，药物输送以及生物传感器方面具有潜在的应用价值。 已经有许多关于固体支撑脂质双层膜（SPBs）和蛋白质相互作用的研究。而拉曼光谱可 以提供有效的分子结构信息。因为液体环境下水的拉曼散射比较弱，所以用拉曼研究液 体环境下的生物分子结构更方便。然而，拉曼散射效应是很弱的，很容易被溶剂的荧光 淹没。最近，拉曼光谱在解决生物问题方面得到广泛关注，已经被成功运用于检测细胞 成分和代谢活动。但是，因为脂质双层膜的厚度只有 4-6nm 厚，所以脂质双层膜的拉曼 光谱很难被探测到。一种结合拉曼光谱仪，显微镜和共聚焦系统的拉曼光谱系统被研发， 可以提高分辨率和信号采集效率，用于研究 SPBs 的拉曼光谱。 在本论文中，主要通过几种方法对含有 GM1 的固体支撑磷脂双层膜与 Aβ(1-40)蛋 白的相互作用进行了研究。我们在固体材料衬底云母和 SiO2 上制备了固体支撑脂质双 层膜，通过荧光显微镜（FM）和拉曼光谱仪得到了云母和 SiO2 上磷脂双层膜的形貌和 分子结构信息。通过云母上加入 Aβ(1-40)蛋白后不同时间的拉曼光谱，详细分析了 Aβ(1 -40)蛋白与含有 GM1 的脂质双层膜相互作用，以及 Aβ(1-40)的构象变化。它证明了自组 装在云母表面的脂质双层膜处于高分子液晶状,更多的神经节苷脂 GM1 的含量可以减少 脂质双层膜酰基链的横向相互作用以及有序性。我们观察到了 GM1 头端的乙酰神经氨 酸的拉曼特征峰，并且发现 Aβ(1?40)蛋白通过与乙酰神经氨酸相互作用，从而与 GM1 绑定，逐步聚合到膜表面。拉曼光谱在 C-H 区域的明显的变化表明 Aβ(1?40)疏水的 C 端插入 SPBs 内部并且影响 S