光活化农药竹红菌甲素对番茄灰霉的关键抑菌因子研究-微生物学专业论文.docxVIP

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独创性声明 本人声明,所呈交的学位论文,是受浙江省自然科学基金项目 (LY12C14005 )资助,在指 导教师指导下,通过我的努力取得的成果,并且是自己撰 写 的。尽我所知,除了文中作了标注和 致谢中已经作了答谢的地方外,论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果,也不包 含在浙江 农林大学或其他教育机构获得学位或证书而使用过的材料。与我 一同对本研究做出贡献的同志, 都在论文中作了明确的说明并表示了谢意。如被查有严重侵犯他人知识产权的行为,由本人承担 应有的责任。 笔肌但 日期: ].101(;, b. 3 论文使用授权的说明 本人完全了解浙江农林大学有关保留、使用学位论文的规定,即 学校有权送交论 文的复印件, 允许论文被查阅和借阅:学校可以公布论 文的全部或部分 内容 ,可以采用影印、缩印或其他复制 手段保存论文 。 保密,在 年后解密可适用本 授权书。口 不保密,本学位论文属于不保密。 (请在方框内打 .j ) 学位论文件 若亲笔签名 :在共冬 日期:早日二? 叫树, 蝇一日 1明 摘要 摘要 摘要 竹红菌甲素(Hypocrellin A,HA)是一种苝醌类光敏化合物,为药用真菌竹红菌 (Hypocrella bambusea)与竹黄菌(Shiraia bambusicola)的次生代谢产物。目前 HA 主要在医学上作为光敏药物进行开发与利用,而作为光活化农药的研究才刚刚起步。 本文采用菌丝生长速率法测定了 HA 对番茄灰霉的抑菌率;根据活性氧淬灭原理 测定了 HA 光活化抑制番茄灰霉过程中的光反应类型;应用 1O2 捕捉原理、芬顿试剂 法和核黄素光化学反应,分析了 1O2、.OH 与 O2.-三种活性氧的产率与其对番茄灰霉 抑菌率的相关性。结果如下: 1.光照强度越大,HA 浓度越高,HA 对番茄灰霉的抑菌率越大,与不含 HA 的对照 组差异均为显著。当光照强度为 12000Lx 时,40 mg.L-1 的 HA 抑菌率可达到 65.15%, 光照对 HA 发挥作用具有重要影响。 2.加入甘露醇、抗坏血酸、组氨酸 3 种淬灭剂并进行光照后,HA 对番茄灰霉的抑 菌率与对照组相比,均极显著减少,表明 HA 的抑菌活性是由光动力作用产生的活性 氧自由基引起的。添加组氨酸后 HA 抑菌率与对照组差异最显著。可见 HA 抑制番茄 灰霉是 Type I 和 Type II 两种光反应类型共同作用的结果,但以 Type II 为主。 3.HA 对番茄灰霉的抑菌率随 1O2 产率增加而提高。1O2 产率和其对番茄灰霉抑菌率 之间呈显著线性正相关(P0.05),回归方程为 Y= 0.703X+0.117,R2=0.986。表明 1O2 在 HA 抑制番茄灰霉病菌中作用极显著,为关键抑菌因子。 4..OH 对番茄灰霉的抑菌率随芬顿试剂浓度增加而提高。.OH 产率和其对番茄灰霉抑 菌率之间呈显著线性正相关(P0.05),回归方程为 Y= 0.0022X+0.0548,R2=0.9101。表 明.OH 在 HA 抑制番茄灰霉病菌中作用极显著,为关键抑菌因子。 25.O2.-对番茄灰霉的抑菌率随核黄素浓度增加而提高。O2.-产率和其对番茄灰霉抑菌之 间呈显著线性正相关(P0.05),回归方程为 Y= 0.77X+0.045,R2=0.934。表明 O .-在 HA 抑制番茄灰霉病菌中作用极显著,为关键抑菌因子。 2 6.逐步回归分析得到最优模型方程为 Y=0.0559+0.8145X1+0.002X2+0.7384X3(X1 为 1O2 产率,X2 为.OH 产率,X3 为 O2.-产率),R2=0.9619。可见 1O2 的偏相关系数最大, 1O2 为 HA 抑制番茄灰霉作用过程中的最关键抑菌因子,其次是 O2.-,.OH 的作用排在 I 第三。 本研究首次找到了竹红菌甲素对番茄灰霉的关键抑菌因子,可为 HA 开发为绿色 高效的生物农药提供理论依据。 关键词:光活化农药;竹红菌甲素;抑菌率;光反应类型;关键抑菌因子 II AB ABSTRACT ABSTRACT Hypocrellin A(HA), as the secondary metabolites of medicinal fungi Hypocrella bambusea and Shiraia bambusicola, is a good Perylenequinonoid photosensitizer in China. As a kind of phototherapy drug, HA has been developed and utilized major in medicine. But as the photoactivated pesticide

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