大蒜多糖的体外抗凝血作用及结构分析-食品与发酵工业.PDF

大蒜多糖的体外抗凝血作用及结构分析 崔莹莹1，张剑韵1，张容鹄2，黄龙全2 1(安徽农业大学生命科学学院，安徽合肥，230036)2(安徽农业大学茶与食品科技学院，安徽合肥，230036) l、GP 擒 要 采用碱提法和DEAE-52纤维素柱层析法，从大蒜中分离纯化出3种多糖组分(GPII和GPⅢ)； 采用体外抗凝血活性试验分析了大蒜粗多糖及其分离组分GPI的抗凝血作用；采用SephadexG一100凝胶层析法 和冻融分析法鉴定GPI的纯度，采用气相色谱分析了GPI的单糖组成，首次采用凝胶渗透色谱与多角度光散 射仪及示差检测器连用系统测定了GPI的分子结构。结果表明：GPI、GPn和GPm分别为大蒜多糖总量的 75．2％、15．5％、9．3％；大蒜粗多糖及其分离组分GPI能显著延长人体血浆的APl广11值．通过影响内源性凝血系 统发挥抗凝血作用；GPI由鼠李糖、果糖、半乳糖、葡萄糖、甘露搪及1种未知单糖组成，构成比例为1．5：1．1： 3．3：l：5．1：3．5，分子质量为5．2×104—5．6×104U，分子旋转半径为31．5—32．9rim，分布宽度指数为1．039 和1．084，分子呈球形。 关键词 大蒜多糖，凝血作用，构分析 血栓栓塞性疾病严重威胁着人类的健康。目前 time，PT)和凝血 APTr)、凝血酶原时间(prothrombin 临床应用较多的抗凝血药物为肝素类多糖，有诱发血 酶时间(thrombintime，TT)检测试剂盒均为上海太 小板减少症等副作用…。开发具有抗凝血作用的非 阳生物技术有限公司产品。无水乙醇、浓硫酸等试剂 肝素类药物及功能性食品有着重要的意义。大蒜是 均为国产分析纯。 药食兼用的佳品，富含蒜氨酸和多种生理活性成分， Sephadex 大蒜多糖(garlicpolysaccharides，GP)是功能成分之 Tu—1800 一，具有抗氧化、抗病毒、增强免疫力、保护肝脏等多 SPC型紫外可见分光光度计(北京普析通 种功效口1。多糖的功能与其结构密切相关。关于大 用仪器公司)；CoatronM1单通道凝血仪(德国TECO 蒜多糖的组成和分子质量的研究结果存在差异¨“1， 对结构的研究有待深入。凝胶渗透色谱与多角度光 Technology公司)。 示差检测器连用系统(美国Wyatt 散射仪及示差检测器连用系统(GPC—MALLS．RI)兼 具凝胶渗透色谱法和光散射法的特点，不需要标准 1．2 大蒜粗多糖的提取、分离和纯化 mol／L 取大蒜100 NaOH溶液500 品，可快速、准确地测定多糖的绝对分子质量、分子旋 g，加入0．5 mol／LHCI 转半径和分布宽度指数，并可判断多糖的构象。本试 mL，55。C水浴浸提，过滤，合并滤液，用l 溶液中和，浓缩至原体积的1／4，离心，取上清液，用 验采用DEAE-52纤维素柱分离纯化大蒜粗多糖，检 5次，加4倍无水乙醇醇沉