缓激肽对大鼠缺血区血脑屏障的影响.pdfVIP

中心提供。 2．主要仪器 Purfusor Compact TBONIC 21型紫外一可见分光光度计。 3．主要试剂 缓激肽(美国Sigma公司)；伊文思蓝(Fluka公司进口分装)。 二、实验方法 1．大脑中动脉缺血模型制作。 2．实验动物分组。 3．神经功能评分。 4．观察指标： (1)应用电镜观察缓激肽对缺血区BBB超微结构的影响。 (2)测定脑组织伊文思蓝含量来判断缓激肽对缺血区BBB通透性的影 响。 (3)测定再灌注24llr后脑含水量的变化来判断缓激肽对继发性脑水肿 的影响。 5．统计学分析 结果用spssll．0软件进行统计学处理，计量资料以(ia-s)表示，实验 组和对照组之间的差异用t检验分析，PO．05视为有统计学意义。 实验结果 一、血脑屏障超微结构的变化 对照组脑缺血2hr再灌注早期，脑毛细血管内皮细胞出现轻度肿胀，但 紧密连接尚未开放，基膜完整，附着于毛细血管周围的星形胶质细胞的足突 局部出现肿胀。而缓激肽灌注组显示，缓激肽作用后紧密连接显著开放。 二、血脑屏障通透性的变化 缺血2hr再灌注lhr的生理盐水对照组的缺血侧EB含量与对侧相比 没有明显变化，缺血侧为1．72±O。21／咀g／g脑重量(丑=8)，对侧为1．53±0． 侧相比有显著变化，缺血侧为5．01±0．97／xg／g脑重量(n=8)，对侧为1． ·2· 含量明显高于对照组的缺血侧EB含量，两者之间差异显著，PO．01。 三、脑含水量的变化 缓激肽灌注组和生理盐水对照组结果表明，缺血2hr再灌注24hr后缺 血侧脑含水量均高于对侧，缓激肽灌注组缺血侧脑含水量为81．74±1． 量为81．21±1．23％(n=8)，对侧为77．96 是缺血2hr再灌注2411r的缓激肽灌注组的缺血侧脑含水量与对照组缺血 侧脑含水量相比无显著性差异，P0．05。 讨 论 本研究表明，缓激肽可以明显增加局部脑缺血大鼠缺血区BBB的通透 性，而对非缺血区BBB的通透性不产生影响。缓激肽对缺血区BBB的通 透性的增加是由于紧密连接的开放所致。并且，缓激肽在增加缺血区BBB 的通透性的同时，并未增加由缺血而引起的继发性脑水肿的程度。 目前，关于缓激肽或其类似物RMP一7选择性增加BBB的通透性的机 制不清。其可能的机制是缓激肽与大脑毛细血管内皮细胞膜上的B：受体 结合，引起细胞内ca2+水平升高，从而引发包括NO和cGMP在内的一系列 的信号传递反应，使胞饮小泡增加或紧密连接开放。应用电镜技术，Hashi． zulne等观察到缓激肽对BTB通透性的增加是通过增加胞饮小泡的转运来 连接的开放导致的。本研究的电镜结果表明，缓激肽对缺血侧皮质毛细血 管通透性的增加，是由紧密连接的开放造成的。缓激肽或RMP一7选择性 作用于BBB，可能与该处BBB的通透性和形态结构发生改变有关。 BBB通透性的同时，并不会增加由缺血而引起的继发性脑水肿的程度。缓 激肽作为血管活性物质，通过扩张血管和增加血管通透性，导致多处组织水 肿的发生。通过颈内动脉给予的缓激肽，剂量小，给药途径有别于外周，故 作用的范围比较局限，因此未产生明显的副作用。另外，由于B2受体的脱 敏作用，导致缓激肽与B：受体结合是一个快速、短暂、可逆的过程，即缓激 肽对BBB的开放快，关闭也快。因此，缓激肽选择性增加BBB通透性的同 时，并未增加脑水肿的程度。 ·3· 脑缺血是I临床常见的症状，缓激肽选择性开放缺血区血脑屏障将有助 于药物向缺血区的转运，从而提示此方法可能是脑缺血早期增加药物向脑 组织转运的一种有效手段。 结 论 1．局部脑缺血再灌注早期，小剂量缓激肽通过开放紧密连接来增加缺 血区血脑屏障的通透性。 2．局部脑缺血再灌注早期，小剂量缓激肽增加缺血区血脑屏障通透性 的同时，未增加由缺血而引起的继发性脑水肿的程度。 关键词：缓激肽；脑缺血；血脑屏障；脑水肿