国人家族性腺瘤性息肉病家系收集与保存及其临床、分子特征研究-肿瘤学专业论文.docxVIP

浙江大学博士学位论文国人家族性腺瘤性息肉病家系收集与保存 浙江大学博士学位论文 国人家族性腺瘤性息肉病家系收集与保存 及其临床、分子特征研究 中文摘要 家族性腺瘤性息肉病(Familial adenomous polyps，FAP)是常见的遗传 性大肠癌之一，约占总大肠癌的1％，可分为经典型家族性腺瘤性息肉病 (Classical FAP，CFAP)，衰减型家族性腺瘤性息肉病(Attenuated FAP，AFAP) 和MYH相关性息肉病(MYH associated FAP，MAP)三种，其临床表现为青春 发育期发生结直肠腺瘤，后逐渐增多，甚至满布所有结直肠粘膜，如不及时干 预治疗，将发生癌变。CFAP和AFAP为常染色体显性遗传，与APC基因的变异 有关，两者的主要区别为肠道腺瘤性息肉数目与癌变年龄不同，CFAP腺瘤数目 较多，常在100粒以上，腺瘤癌变的年龄也较轻，而AFAP腺瘤数常在100粒 以下，平均癌变年龄为55岁左右。MAP较少见，属于常染色体隐性遗传，与 ff{H基因突变有关，估计约占FAP的5—10％左右，目前对其是否属于FAP尚有 不同的看法。 在FAP的临床表型和遗传病因的研究上，国外研究已基本明确：FAP的肠 内主要表现为多发性腺瘤性息肉，数目可因类型不同而有差异。肠外表现中， 常见眼底视网膜色素上皮增生(CHRPE)，上消化道息肉，硬纤维瘤，肝血管瘤 和牙异常等，其中CHRPE最常见，有75—80％的FAP患者可检出CHRPE，其次为 上消化道息肉和硬纤维瘤。约30-80％的FAP家系能检出APC基因的突变，研究 还发现了APC基因的突变位点与疾病临床表型的一些相关性。 尽管国内外FAP的诊治在近几十年来有所进展，但仍然存在一些问题， 对FAP腺瘤与散发性腺瘤及各类FAP的诊断主要是从临床表型(家族史，腺瘤 2 浙江人学博J学位论文数)出发，但单从临床表型有时很难甄别多发性的散发性腺瘤和无家族史的可 浙江人学博J学位论文 数)出发，但单从临床表型有时很难甄别多发性的散发性腺瘤和无家族史的可 疑AFAP，也不能早期判断FAP腺瘤癌变，然而，判断是否FAP腺瘤，及其癌变 与否可帮助诊断FAP，及选择预防性肠切除的手术时机和预后判断。随分子生 物学的发展，FAP的相关基因APC基因等的发现，及突变检测技术的改进如灵 敏度高的高通量突变检测方法一变性高效液相色谱(denaturing High performance liquid chromatography， DHPLc)的应用和蛋白质组学研究方法 的 进 展 如 SELDI-TOF-MS ( Surface Enhanced Laser Desorption／Ionization—Time of F1ight—Mass Spectrometry，表面加强激光 解吸电离一飞行时间质谱)技术的应用，因此有可能在分子水平(包括基因和 蛋白水平)来明确FAP等疾病的分子特征，从而帮助鉴别诊断。因此，除临床 表型分析外，应在分子水平检测彳户口基因的突变，同时还应在蛋白水平寻找新 的生物标记来帮助早期甄别FAP腺瘤和散发往腺瘤及FAP腺瘤癌变与否等FAP 和大肠癌诊治中亟待解决的问题。 SELDI-TOF—MS是最近几年才发展起来的一种新的蛋白质组学研究方法，可 分析海量蛋白，已成功用于散发性大肠癌和妇科肿瘤，脑肿瘤等的早期诊断， 证明为一有效的蛋白质组学研究方法，可用于寻找肿瘤相关的血清蛋白指纹图 谱，但目前未见用SELDI—TOF方法研究FAP腺瘤等的蛋白指纹图谱的研究报道。 至今为止，国内对FAP的临床研究多为单纯的病例分析，大样本的研究少 见，对国人FAP的肠外表型特征研究不够重视，因此，对国人FAP的临床和分 子表型特征还应进一步研究并充实。同时随年代变迁，如再过10～30年左右， 我国原先的大家庭将逐渐消失，FAP大家系的遗传资源也将随之消失，不利于 国人FAP家系的诊治和病因研究。 因此，本研究对t AP家系的遗传资源进行了系统的收集和保存，对FAP临 床表型尤其是CHRPE的特征等进行了深入的研究，在此基础上，应用灵敏度高 的高通量突变检测方法一变性高效液相色谱(DHPLc)建立了检测APC基因突 浙江人学磷j学位论文变的条件和技术平台，分析了国人FAP家系的临床表型特征和遗传表型及两者 浙江人学磷j学位论文 变的条件和技术平台，分析了国人FAP家系的临床表型特征和遗传表型及两者 的相关性，进一步明确了国人FAP的分子基础。同时，结合散发性腺瘤，应用 SELDI--TOF技术检测FAP腺瘤与散发性腺瘤、FAP腺瘤癌变者及家系健康成员 的血清蛋白质指纹图谱，以发现各组的虹清蛋白指纹图谱的差异，建立各组间 的质谱判别模型，帮助临床判别FAP腺瘤和