铁过载对斑马鱼成骨影响的机制-中国骨质疏松杂志.PDF

史垦宣重堕坠盘查!!!!生!旦箜丝鲞箜!塑垦!也!Q!!!!P!竺!：韭!!!!!!：!!!丝!塑!=! 里!坐!型!!!坐!!!：!!!塑g!!堡：!婴：竺i!i；!!：!!!14：生!：!!!!!!!!：!!!!：!!：!!! 713 ·论著· 铁过载对斑马鱼成骨影响的机制 姜宇1 阎一林2 朱国兴h 徐又佳3 1．南京医科大学附属无锡市第二人民医院，骨科214000 2．美国俄勒冈州立大学 3．苏州大学附属第二医院骨科 中圈分类号：R68 文献标识码：A 文章编号：1006·7108(2016)06．0713m5 摘要：目的通过高通量转录组的方法测序高铁环境生存的斑马鱼与和野生型的斑马鱼，通过比较筛选出铁过载对于成骨 影响的通道，通过在体以及离体的一系列实验证实铁过载对这些通道的作用。方法 通过在斑马鱼高铁环境下生存，造成斑 马鱼铁过载，在4天后提取其RNA和野生型斑马鱼提取的RNA进行高通量转录组测序比较，筛选出成骨Bmp2通道，并用定 量QPCR验证。在体实验中将Run】【2a标记的转基因斑马鱼在高铁环境下与正常环境在第九天进行比较，观察其荧光的变化； 等成骨基因均下调，观察发现Run】【2a标记的转基因斑马鱼高铁环境下与正常环境相比基因表达明显下调，在细胞转染实验 通过高通量转录组测序，我们发现 中，荧光素酶报告基因Runx2a在Bmp2a转染下大幅升高，转染铁后Runx2a下降。结论 铁过载对于BMP2的抑制影响，运用在体以及离体的一系列实验证实铁过载对Bmp2的抑制作用从而导致成骨代谢的异常。 关键词：高通量转录组测序；成骨基因；转基因鱼；骨形态发生蛋白2通道 TheeffectandmechanismofironoVerloadonzebrafish osteogenesis 儿ANG Yul，YANYilin2，ZHu Youjia3 Guoxin91，xu of Second in Medical 0nhopedics，the 1．Department People’sHospitalWuxi，NaIljingUniversity，wuxi214000，China 2．TheState of UniVersity Ore90n，USA of Second AffiliatedtoSuchow 3．DepanmentOnhopedics，theHospital University author：zHu cor_responding Guoxing，Email：jiangyu314@sohu．com method tlleeffectofiron on Abstract： to overloadzebra ObjectiVeusinghigh—mrou曲puttranscriptomesequencing compare toconf．mmtheeffect on fish ofimnoverload channel aseriesofinvivoandinvitro RNA，and osteogenesis thmugh experiments． MethodsThezebra