玫瑰SRAP亲缘关系遗传多样性品种分类指纹图谱论文.docVIP

玫瑰论文：玫瑰遗传多样性的SRAP分析与品种指纹图谱构建 【中文摘要】玫瑰(Rosa rugosa)是蔷薇属重要的观赏灌木,具有重要的观赏价值和经济价值,也是蔷薇属植物育种的重要亲本。本研究以4份野生玫瑰种质、46个玫瑰品种、2个月季品种、2个蔷薇品种和2个黄刺玫品种为材料,以SRAP分子标记为研究方法,对玫瑰的遗传多样性及其与近缘种植物的亲缘关系进行了研究,在此基础上构建了玫瑰品种的指纹图谱,为杂交育种的亲本选择、品种鉴定、新品种保护、品种分类等奠定了基础。主要研究结果如下:1.在正交试验设计的基础上得到了玫瑰最适的SRAP-PCR反应体系,即在25μL反应体系中,含有10×PCR buffer 2.5μL,Mg2+ 2.0 mmol/L,dNTPs 0.20 mmol/L,Taq酶1.5U,引物0.25μmol/L,模板1.0 ng/μL,其中,各因素对PCR反应的影响从大到小依次为:Taq酶,dNTPs,引物,Mg2+,模板;扩增程序为94℃预变性5 min; 94℃变性1 min,35℃退火1 min,72℃延伸1 min,进行5个循环;94℃变性1 min,50℃退火1 min,72℃延伸1 min进行30个循环;72℃延伸10 min, 4℃保存。2... 【英文摘要】Rosa rugosa which has great ornamental and economic value is an important kind of ornamental shrub of genus Rosa, it is also the concernful parental in cross breeding. The genetic diversity and relationship of 4 wild germplasms and 46 cultivars of Rosa rugosa and 2 cultivars of Rosa, Rosa multiflora and Rosa xanthina respectively was evaluated according to SRAP markers in this study, the fingerprint of Rosa rugosa was also established. This can give parental selection in cross breeding, identification, righ... 【关键词】玫瑰 SRAP 亲缘关系 遗传多样性 品种分类 指纹图谱 【英文关键词】Rosa rugosa SRAP genetic relationship genetic diversity classification fingerprint 【目录】玫瑰遗传多样性的SRAP分析与品种指纹图谱构建 符号说明 4-8 摘要 8-10 Abstract 10-11 1 引言 12-25 1.1 相关序列扩增多态性(Sequence-Related Amplified Polymorphism , SRAP)分子标记技术 12-20 1.1.1 常用的分子标记技术 12-14 1.1.2 SRAP 标记的原理和特点 14-15 1.1.3 SRAP 分子标记技术在观赏植物中的应用 15-20 1.2 观赏植物指纹图谱技术 20-24 1.2.1 蛋白质电泳指纹图谱 20-21 1.2.2 DNA 指纹图谱 21-24 1.3 本研究的目的与意义 24-25 2. 材料与方法 25-31 2.1 材料 25-26 2.2 仪器与试剂 26 2.2.1 主要仪器 26 2.2.2 试剂 26 2.3 玫瑰基因组DNA 模板的制备 26-27 2.3.1 DNA 的提取 26-27 2.3.2 DNA 质量检测 27 2.4 玫瑰SRAP-PCR 反应体系的优化 27-29 2.4.1 SRAP-PCR 扩增 28 2.4.2 电泳检测 28 2.4.3 反应体系稳定性的检测 28-29 2.5 引物筛选 29 2.6 供试材料的PCR 扩增与产物检测 29-30 2.6.1 供试材料的PCR 扩增 29 2.6.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳 29-30 2.6.3 银染显色 30 2.7 数据统计与结果分析 30-31 2.7.1 电泳结果统计 30-31 2.7.2 玫瑰亲缘关系和遗传多样性的SRAP 分析 31 2.7.3 玫瑰品种指纹图谱的构建 31 3. 结果与分析 31-42 3.1 玫瑰基因组DNA 的提取 31-