赭曲霉毒素A直接竞争ELISA试剂盒的研制.pdfVIP

2012年9奠 中国粮、撞学报 Vot。27，No．9 oftheChineseCerealsandOilsAssociation 第27卷第9期 Journal Sep。2012 赭曲霉毒素A直接竞争ELISA试剂盒的研制 李沐洁1 奚 茜1 张明洲t2 陈宗伦2 王唯芬1 (浙江省生物计爨与检验梭疫重点实验室 中阁计量学院生命科学学院1，杭州310018) (抗麓遭愚科技有限公蔼2，杭娥310013) 盒。在0～10ng／mL范霞态，该试裁盒50％抑黼率(1C∞)秀1。09ng／mL，检溅灵敏度(1C15)麓0。08ng／mL；与 (R2)分别为0．94、0．88和0．90；检测时间只需20min，可用于花生、玉米及玉米粉中OTA的批量快速筛查。 关键词赭曲霉毒索A 多克隆抗体直接竞争ELISA 文献标识码：A 中囤分类鼍：TS207．3 文章编号：1003—0174{2012j凹一Oll6—08 ochra— 3、液相色 赭越霉毒素主要是由赭曲霉(Aspergillus CellS)及纯绿青霉(Penicilliumviridicatum)等有毒真谱串联质谱法雒2。引、酶联免疫吸附法H4_懿等。但 菌在恶劣环境条件下产生的有毒次级代谢产物…， 色谱分析需要昂贵的仪器、复杂的样晶预处理(净 属烈性的翳脏积鹫脏毒素。它包括7耪化学继构穗 化，浓缩或衍生)秘大量的有枧溶剂狸其他化学 似的仡合物，其中毒性最大、分布最广、产毒量最高、 品u¨，不能满足基鼷大规模筛查和现场擒检的需要。 对农作物污染最重、对人和动物影响最大的是赭曲 酶联免疫分析(ELISA)方法可以在较短时间内完成 霉毒素A(OTA)。OTA具有肾脏毒性、肝脏毒性、免 大量样照的分析，操作简便，成本比较低，适合捧力 疫毒性、以及致畸、致癌和致突变作用等多种毒性， 大量阴性样品的快速筛选H84。本研究在错备OTA 对动物和人体健康有很大的潜在危害∞J。1993年，特异性多克隆抗体的基础上，采用直接包被抗体的 InternationalforRe- 匡际癌症獗究槐梅(The Agency 方法成功研裁凄OTA直接竞争酶联免疫(ed～ searchonCancer，LARC)将OTA定为2B类致癌物 (即可能引起人类癌症的物质)口1。因此世界各国均 法的建立和拥有自主知识产权检测试剂盒产品的开 重视对赭逮霉毒素A的检测帮控割，欧显于2006年发羹定基懿。 12月19日制定欧盟委员会条例(EC)N01881／ 2006¨J，规定谷物原料中OTA最大限量为5¨∥蚝， l 材料和方法 谷物魏工铡晶稔直接供人食蔫的谷物中最大限量势 l。1主要试剂 3pg／kg，婴幼儿食品及有特殊医疗目的婴儿食品中 赭曲霉毒素A、赭曲霉毒索B、赭曲霉毒素C、黄 不超过0．5斗∥kg；我国也规定供人食用谷类和豆类龅霉毒素B，、黄蓝霉毒素M，、玉米赤霉烯酮、伏马薄 中OTA的最大限量为5 I＆g／kg譬』。 陶前OTA的检测方法主要有薄层色谱法 蘩众项耳：浙江省重大科技专项(2006C12102)，杭州市爨犬科技 3，3’，5，57一四甲基联苯胺(TMB)、弗氏完全与不完 毯毅专硬25)，潺汪省重点耱技翻凝霞酞 (2010R50028)，浙江省科技成果转化项强(2011E 61018) 收稿日期：2