绵羊胚胎不同发育阶段及其组织中MicroRNA-483-5p表达分析.pdfVIP

新疆农业科学2016，53(4)：778—784 Sciences XinjiangAgricultural doi：10．6048／j．issn．1001—4330．2016，04．025 绵羊胚胎不同发育阶段及其组织中 MicroRNA一483—5p表达分析 张译元，唐红，郭延华，王新华，王立民，周平 (新疆农垦科学院畜牧兽医研究所／新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室，新疆石河子832000) 摘要：【目的】研究MicroRNA(miR)483—5p在中国美利奴羊胚胎不同发育阶段肾脏和脐带组织中的表达 变化，以了解其在绵羊胚胎发育中的重要作用。【方法1选择中国美剥奴羊胚胎不同发育时期(45、85、115和 135d4个时期)肾脏和脐带组织为研究材料，采用半定量RT—PCR检测第45d绵羊胚胎不同组织中miR一 483—5p的表达；同时利用实时荧光定量PCR对miR一483—5p在绵羊胚胎不同发育阶段肾脏和脐带组织的 d胚胎各组织中广泛表达，其中以肌肉、 表达变化进行实时检测。【结果】miR一483—5p在所检测的绵羊45 心脏和肺脏组织表达丰度最高。实时荧光定量PCR结果显示，不同发育阶段绵羊胚胎肾脏和脐带组织miR 一483—5p的表达具有明显的时空选择性。脐带组织miR一483—5p随着胚胎发育其表达量呈逐渐下降的趋 势；肾脏组织miR一483—5p则是随着胚胎发育在第85d其表达量下降到最低，其后在115和135d其表达量 又逐渐上升。不同发育阶段胚胎肾脏、脐带组织miR一483—5p的表达量呈显著性差异(P0．05)。【结论l miR一483—5p在绵羊胚胎不同发育阶段肾脏或脐带组织中表达明显不同，表明其表达具有选择性；依据miR 一483—5p表达的差异性及其涉及的生物学功能。推测miR一483—5p在绵羊脐带和肾脏组织中具有一定的 调控作用。研究为进一步了解miR一483—5p在胚胎肾脏和脐带发育中的作用机制提供一定的理论依据。 关键词：绵羊；胚胎；miR～483—5p；表达分析 中图分类号：s827．1 文献标识码：A 文章编号：1001—4330(2016)04—0778—07 miRNA的功能不但涉及调控胚胎发育、细胞增 殖、细胞凋亡、细胞死亡、脂肪代谢、细胞分化等方 【研究意义】MicroRNA(miRNA，亦称微面，还与动物生殖，如卵巢生物学过程鹋’9】、乳 腺‘10】、睾丸‘111、肌肉‘12’等方面息息相关。miR— RNA)是一类长约22个核苷酸的小分子非编码 RNA。miRNA主要通过与靶基因mRNA的特定NAs在动物胚胎发育中可能起到作用有：在不同 位点结合，抑制该蛋白的合成或诱导mRNA的降发育周期的空间和时间上调控某些基因的表达； 解，从而参与基因的表达调控【l—J。miRNA在各参与调控雄性生殖细胞的发生过程，尤其是生殖 种生物中普遍存在，据统计大约有30％左右的功 细胞的减数分裂过程；参与胚胎的背腹模式、前后 能基因表达受控于miRNA。这些miRNA只在特 模式、四肢、神经系统的形成等。【前人研究进 定的组织表达HJ。自1993年Lee等【40在线虫中展】miRNA 483—5p是一类具有重要功能的miR— 发现第一条miRNA lin一4以来，研究人员陆续从NA。已有研究表明，miR一483—5p调控胰岛素 m1．hSClt． 动物的线虫、果蝇(Drosophila)、家鼠(Mus 沁)、人(Homo