日立电镜三维解析方案之透射电镜连续切片重构.PDFVIP

日立电镜三维解析方案之透射电镜连续切片重构 透射电镜通常只能观察单个切片的图像信息 ，如果能够将许多张连续切割切片的 相同视野的图片，再软件可以将其合成为一个三维图像，就可以获得相应三维区域的 空间结构图像。而超薄切片机可以实现样品的多次多层连续切割，只需将这些连续切 片收集到铜网上，则借助透射电镜的观察功能可以获得样品一个立体空间内的三维结 构数据。 日立透射电镜可轻松实现连续切片的自动拍摄 Application 超薄切片机可以实现几十纳米厚度的切割精度，通过多层切割实现大范围的切割， 从而保证三维重构的高精度和大范围。下图样品为被 Microbtryum lychnidis-dioicae （一种真菌）感染的 Silene latifolia （白麦瓶草 ），在收集图像过程中分三次进样， 共拍摄了 123 张连续切片照片。下图是展示了其中不同阶段的三张照片（第 1 片、第 53 片和第 113 片）。从图中可观测到 Microbtryum lychnidis-dioicae 团簇在母体细 胞间分布的变化（黄色箭头）。 从不同连续切片拍摄的照片（第 1 片、第 53 片和第 113 片） 使用三维重构软件可将上述连续切片的照片合成为一个三维立体图像。下图为使 用 Image-Pro®Premier 3D (Media Cybernetics Inc.) 软件，重构上述 123 张照 片，剔除无法使用的部分数据，最终获得 107 张照片合成的三维图像。可以观察到 Microbtryum lychnidis-dioicae 菌丝及其不同组成部分在植物细胞间隙的立体形 貌。同时，观察到 Microbtryum lychnidis-dioicae 薄细胞壁及厚细胞壁的不同分 布，前者会发展为次级菌丝，而后者会发展为厚壁孢子。 （a ）三维重构获得的立体结构数据；（b、c ）Microbtryum lychnidis-dioicae ，红色：细胞壁、绿色：细胞质。