果梅核心种质的构建与分子标记的研究-果树学专业论文.docxVIP

摘要 摘要 果梅核心种质的构建与分子标记研究 高志数 指母教师：韩振海教授 章镇教授 果梅(PrunusⅢ∞e Sieb．etZuce．)是原产于中国的特色创汇树种。我国果梅种质资源丰富， 屠世界之首。为了更好地保存窝鬟瘸这些种质资源，我们利用SSR分予标记技术对果梅稚质资源 的遗传多样性避行了分析。同时对果梅种质枝条的抗寒性进行了鉴定，并筛选出花果兼用的优异 的梅糟藤，建立了果梅豹核心静壤，荠研究了分子毒器记在果梅秘质瓷源研究孛鹣应用，主要磅究 内容如下： 1以果梅黯张小叶猪肝为试材，研究了果梅SSR技术中，PCR反应体系的主要成分对SSR扩 增结果的影响，并浇较了采用{#变性聚丙稀酰胺缀胶及琼脂糖电泳检测扩增产物多态住豹差异。 在PcR反应体系中，各主要成分的最适浓度分别为：M92+为1．89 mmol·一～2．82 mmol·L～：dNTP 为0。24 mmol·r；；|耪为0，38umol·L-2；Taq聚会酶秀在26．5ul菠寝体系孛翔天lU。琼疆耱 电泳检测的DNA多态性不如非交性聚丙稀酰胺凝胶率富。利用此反应体系，对24个果梅代表品 神进行了SSR反应，在非变性聚鬻稀酰胺凝胶上，扩增产物在lOObp～200bp之阀，不阁品种阊 DNA谱带多态饿丰富。 2以果梅品种‘大时猪肝’的基因缝DNA为模板，刹用在桃基因组开发的微卫擞引物对 UDP96008和pchgms2避行PCR反应，扩增产物郾窿测序，并将测弹结果和Gcnbank上已发表 的微卫星序列谶行同源性分析，同时应用在同属植物上开发的14对SSR引物对来源于不同地区 的果梅种质资源进行了分析。结莱表明：由引物对DP96008扩增得剜豹擞卫星序列和Genbank 上己发表的桃的微卫星序列的同源性为98％；14对SSR引物对24份果梅种质资源进行扩增，共 获褥129令DNA冀段，平均每；c孛；}搬获褥2。5条徽卫星菏投；透过分凝聚类糖状图表绢，供试 的种质中‘南缸’和‘中红’的潦缘关系较近，且中国品种和日本品种没有明显分开隳为两类。 3通过电鼯法对28份果梅秘质的枝条抗寒性避行了比较分析，蝴对研究了枝条的可溶性蛋 自、可溶性糖和丙二醛的含量与暴梅种质抗寒性的关系。结果表明：粜梅种质资源豹抗寒性存在 着很大的差异，经12小时低温处理，其枝条的半致死温度在．9．3C一-20．2C之间，可以将28个果 梅品耪撮据半致死温霞分为三类，其中丰嚣、商爵事后、软条红梅等静震浇较撬寒，半致死温璇 分别为．20．2C、．17．7℃和．19．3℃；东青、开蒂和红顶等种质抗寒性较麓。半致死温度分别为．9．4 ℃、-9．4C帮．9，3C：果梅枝条孛可溶性蛋白和糖类每静质的抗寒性呈疆糟关关系，相关系数分别 为0．93959和O．86709而与丙二醛含量呈负相关关愆，相关系数为一0．952122。 4对愿产予我国的梅晶静的筏和果实性状进行了全亟豹调查与分辑。扶197个果梅菇静中筛 选出9个品种；从118个花梅品种中筛选出21个鼎种，共计30个品种可作为花果兼阁型品种进 行栽培。同时还讨论了花果兼甩溅品种选育的必要性及应用前景。 lI 耋鋈瑟鍪奁耋鎏蠢茎g；圣盗。。。。。， 耋鋈瑟鍪奁耋鎏蠢茎g；圣盗。。。。。， ，。 。，。，，， !，。。。， ：：垫。!!羹 5对原产予我国的果梅种壤资源蓠先提据传统鹣分类方法分为自梅类、青梅类髑红梅类3缀， 然嚣簿组势g《撩摆耱震稳缮态特缝及农艺瞧获等27个基零数据藕特征数据进翁聚粪分拆帮捧穿， 并参考同工酶、RAPD和SSR结果，从202个果梅晶种和优椿中筛选获得丁果梅棱心种质20份， 并对梭心种质的代表性进行了检验。 6应瘸RAPD分子标记按本器SCAR分子蠡记羧零磺究7-褥萃瓣菝与囊瓣蕊稳荧鑫孽分予标记。 结粜表明{扶34个随机引物中筛选刘一个多态佳日l物OPPOI，扩增出只省攀瓣花炭瓤具有分子鬣 约必1900bp瓣DNA特异_垮敬；经巍壤灏穿表明该DNA篾段太小舞1899bp，鞣OPPOI-I)S一1899； 投舞该序捌设计大夺分裂势25bp耦24bp的一对萼l物SSI)-I秘SSI)-2，将RAPD标记转为SCAR标 记，该标记大小为1079bp。通过91个单复瓣花单株或品种溅行检测，SCAR标记的总体有效率为 77．7％。 关键词：累梅，核心种震，分子括记 Ill AbstractCore Abstract Core Collection and Molecular Marker of Japanese Apricot (erunus lnume Sieb．et Zucc．) Gao Zhihong Supervised by Prof．Han Zhenhai and Prof．Zhang Zhen Japanese apricot(P