地中海贫血的分子基础和产前诊断-徐湘民.pptVIP

血液学分析指导血红蛋白病诊断的一般原则 用于? 和 ?地贫临床基因分型的实验室流程 Gap-PCR / MLPA (1) 临床样品 ?-地中海贫血 ?-地中海贫血 Gap-PCR / MLPA (2) RDB / PMCA (1) RDB / PMCA (2) FBC / Hb Analysis Hb CS etc Hb F 5% 中国南方发现的5种占人群90%的常见 地中海贫血基因突变 地中海贫血的DNA诊断 ?-地贫:基因缺失分析技术 ?-地贫:基因点突变分析技术 ? Reverse Dot Blot （RDB）: 反向点杂交 ? probe melting curve-based genotyping assay （PMCA）: 基于探针熔解曲线的基因分型 ? Gap-PCR : 缺口PCR ? Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification （MLPA）: 多重连接探针扩增 ? 检测基因拷贝数的荧光定量PCR 地中海贫血的血液学表型特征 ? RBC 参数 MCV ? MCH ? 细胞形态变化 ? Hb 成分分析 Hb A2 ? (?) 或 ? (?) Hb Bart’s Hb H (?) Hb E (?) 1 2 3 4 5 Normal AA2 AE Bart’s AF HA + - 500V, 25min 血红蛋白电泳图谱 1. 正常人Hb 2. 轻型?地贫 3. 异常Hb E杂合子 4. 新生儿Hb Bart’s (?4, ?地贫标准型） 5. Hb H 中间型?地贫的临床特征 ? 轻度黄疸 ? 肝脾肿大(脾大明显) ? 骨髓扩增 ? 合并感染 不需进行常规输血治疗 血红蛋白水平维持在60-100g/L水平 发病年龄在2岁以后, 或成年期发病 ? ? ? 中间型?地贫的临床特征 ? 轻度黄疸 ? 肝脾肿大 (脾大明显) ? 骨髓扩增 ? 合并感染 不需进行常规输血治疗 血红蛋白水平维持在60-100g/L水平 发病年龄在2岁以后, 或成年期发病 ? ? ? 重型?地贫 重型?地贫 中间型地贫 地贫是严重致死、致残性遗传性血液病 地中海贫血的防治对策 重症地贫患儿的出生是世界公认的公共卫生问题 通过产前诊断阻止重症患儿出生是首选预防措施 WHO优先推荐在发展中国家实施预防的遗传性疾病 预防地贫是中国南方高发区减少出生缺陷的战略需求 地中海贫血的预防控制 TIF Publication, 2003. 地中海贫血的研究策略 建立一系列诊断 标准和诊断技术 遗传流行病学 调查 大人群监控和 预防 用于基因分型 用于产前诊断 指导制定计划 ?和?地贫发生的分子遗传学机制 ? ?-珠蛋白基因缺失 ? 中间型地贫: 复杂变异 ? ?-珠蛋白基因点突变 ?和?地贫发生的分子遗传学机制 ? ?-珠蛋白基因缺失 ? 中间型地贫:复杂变异 ? ?-珠蛋白基因点突变 13种导致中国人?-地中海贫血的缺失突变 地中海贫血预防控制操作指南. 人民军医出版社, 2011. ? ? ? ??2 ??1 ?2 ?1 ? 3’HVR inter ξHVR 5’ 3’ 4个功能性的α基因 3个功能性的α基因 2个功能性的α基因 0个功能性的α基因 1个功能性的α基因 正常 静止型α地贫 轻型α地贫 HbH病 Hb Barts胎儿水肿综合征 ?地中海贫血表型和基因型的关系 12种见于中国人群的导致 ?2/?1珠蛋白基因表达降低的突变 CD59 错义突变 小缺失或插入 终止密码突变 移码突变 IVS I IVS II UTR UTR 5’ 3’ CD13 CD31 CD125 CD122 CD142 CD44–45 CD49 CD30 CD78 CD74 CD118 ?2 ?1 EXON II EXON I EXON III 地中海贫血预防控制操作指南. 人民军医出版社, 2011. 中国南方人群不同基因型Hb H病的分布 Unpublished Data, 2012.