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临床常见微生物标本采集法及影响临床微生物检验的因素
引子:
流行病学调查显示,临床感染病原菌种类不断发生变化,对抗微生物药物的耐药性不断增强,因此,临床医生在抗感染治疗中越来越重视病原学的检测,对微生物室的工作要求越来越高。微生物室任务越来越爱繁重。
临床医生要求微生物室应做到:
菌种鉴定准确
药敏试验准确
回报结果快速及时
做好咨询与解释工作
常见病原体种类
流 程
感染性疾病
在细菌检验中,许多因素可以影响检测结果的准确性,我们在工作时应当加以注意,主要包括以下几个方面:
标本的采集与运送
细菌的鉴定及药敏试验
结果的审核与报告
标本的采集与运送对于检验结果的重要性
正确的采集与运送标本是保证检验结果准确的最基本条件,如果得不到一份合格的标本,鉴定及药敏结果再准确,结果也是不可信的。而从目前状况看,采集一份合格的标本,不是一件容易的事情,微生物检验标本的正确采集、运送及处理,与细菌的培养、鉴定结果有十分密切的关系,医生、护士、检验人员均应重视微生物标本的正确采集的有关问题,并有责任向患者及家属进行正确采集标本的宣传和指导.
典型案例
我们在临床检验工作当中遇到过这样的事情,脑积水患儿准备进行手术,术前三次脑脊液培养均分离出表皮葡萄球菌,脑脊液常规检查正常,污染菌?病原菌?临床请求会诊。
标本采集运送中的影响因素
• 抗微生物药物对标本的影响
抗菌药物抑制细菌生长,影响检出率,应当在应用抗微生物药物之前采集标本,或者停药3~5天采集标本,或在血浆药物浓度最低时采集标本。
• 标本留取是否正确
无菌部位的标本采集是要严格消毒,无菌操作,避免污染。如:血液、无菌体液。主要注意两个方面,一是穿刺部位的消毒,二是在将标本注入容器时的无菌操作。
如: 肺感染 ——痰
泌尿系感染——尿
脓肿——脓汁
颅内感染——脑脊液
发热——血、骨髓、尿等
根据可疑感染的部采集相应的标本
临床实验室细菌分类
★需氧、微需氧或兼性厌氧菌
※非苛养菌:包括肠杆菌科细菌、假单胞类非发酵菌、不动杆菌、葡萄球菌属、肠球菌属、链球菌属(不含肺炎链球菌)
※苛养菌:嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌
★厌氧菌
标本采集和运送
标本采集的时间、部位、种类和数量
注明相关信息
(由各种病原体所致感染性疾病的病程来决定)
微生物标本采集、运送、验收和处理注意事项
1、标本采集
(1)申请单必须标记清楚姓名、性别、年龄、病原号、标本来源(具体写明)、检查项目(目的要明确)等,以便试验室能够合理选择培养环境和培养基。
(2)尽量在抗生素应用前采集标本、以提高阳性检出率和避免漏检。
(3)标本采集应严格执行无菌操作。
(4)采集标本的容器必须经灭菌处理,不可用消毒剂。
2、标本运送
(1)标本采集后应尽快运送到细菌室。
(2)标本采集后在室温下超过2小时未送到细菌室的,可视为不合格标本。
3、标本验收
(1)实验室只接受和处理合格标本。
(2)实验室对不合格标本退回必须说明原因、并及时与临床联系。
注意事项
(1)微生物检验样本必须要求采集转运,否则将影响检查结果,并给评价其意义带来麻烦甚至误导。
(2)微生物样本极易被污染,污染的样本杂菌大量繁殖抑制病原菌生长,条件致病菌也是致病菌,如污染条件致病菌将误导临床,造成对患者的损害以及经济和时间的浪费。
(3)某些标本离体极易死亡,应在床边采取和接种或立即保温送至实验室检验。室温放置或延迟送检,可使检出的阳性率降低;不能使用冷藏的样本检验。
(4)厌氧菌样本采取必须隔绝空气,混入空气的样本影响检验结果,不能使用。
血液标本
正常人血液是无菌的,血液标本病原学检查有助于菌血症、败血症的诊断和疑由菌血症所致其他症状,如皮疹、肝脾肿大、关节疼痛、昏迷休克等的鉴别诊断。并通过药敏试验为临床治疗提供合理的抗生素选择。
采集时间
发热初期
寒战期
抗生素应用之前
下次用药之前
临床常见的采血指徵
发热(38C)或低温(36C)
寒战
白细胞增多(计数大于10,000109/L,特别有“核左移” 未成熟的或杆状核的白细胞)
粒细胞减少(成熟的多核白细胞1000109/L)
血小板减少
皮肤粘膜出血
昏迷 ,休克
多器官衰竭
CRP升高
采血指徵
采集方法
2.采样量:
不少于培养基的1/10。
成人采血5~10ml
骨髓1-2ml
儿童采血1~5ml
3.培养要求:除有明确的感染
特征,应同时送需氧、厌氧培养。
1.采血部位:
肘静脉:无菌采集,1-3次
其他部位:亚急性心内膜炎等
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