双硫仑纳米混悬剂的制备及体内外抗乳腺癌研究-药学学报.PDF

药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2019, 54(3): 565 −573 ·565 · 双硫仑纳米混悬剂的制备及体内外抗乳腺癌研究 1,2# 1,2# 2,3 1,2* 季宇彬 , 刘 彪 , 于润琪 , 王向涛 (1. 哈尔滨商业大学, 生命科学与环境科学研究中心, 黑龙江哈尔滨150076; 2. 中国医学科学院、北京协和 医学院药用植物研究所, 北京 100193; 3. 黑龙江中医药大学药学院, 黑龙江哈尔滨150040) 摘要: 双硫仑(disulfiram, DSF) 是一种传统的戒酒药物, 最近研究发现其对多种癌症类型均表现出强烈的生长 抑制作用, 但是水溶性差、在胃肠中不稳定及血浆半衰期短的缺点限制了其药效的发挥。本研究拟将DSF 制备成纳 米混悬剂(DSF-NSps) 来解决此问题。采用超声条件下的反溶剂沉淀法制备DSF-NSps, 以纳米粒的粒径、多分散性 指数(PDI) 、zeta 电位和放置稳定性等为指标筛选稳定剂。采用动态光散射法测定粒径、PDI 和zeta 电位, 透射电镜 观察纳米粒形态; 通过DSF-NSps 在不同生理介质中的粒径变化来考察DSF-NSps 在介质中稳定性。HPLC 测定载 药量, 用透析的方法测定体外药物释放, MTT 比色法测定纳米粒和游离双硫仑的体外细胞毒性, 进而用4T 1 荷瘤 小鼠研究纳米粒的体内抗肿瘤药效。所有动物实验符合动物实验伦理学标准, 并获得中国医学科学院药用植物研 究所实验动物伦理委员会批准。结果表明, SPC (大豆磷脂)/TPGS (生育酚琥珀酸聚乙二醇酯) 组合稳定剂为DSF 的优良稳定剂, 药载比为DSF-SPC-TPGS = 24 ∶20 ∶4 时, 制得的DSF-NSps 粒径较小且放置较稳定, 其载药量为 (45.36 ± 2.09) %, 平均粒径为175.0 ± 0.75 nm, PDI 为0.24 ± 0.07, zeta 电位为-14.3 mV, 外观呈球形; DSF-NSps 在磷 酸盐缓冲液、生理盐水、5% 葡萄糖溶液、人工肠液、人工胃液和血浆中均能稳定存在, 满足静脉注射及灌胃的要求; 体外研究显示纳米粒装载显著提高了DSF 在水相体系中的稳定性, DSF-NSps 可缓慢释放包封的药物, 并能提高 DSF 对癌细胞的生长抑制作用(纳米粒和游离DSF 在48 h 的IC50 分别为1.07 和5.53 μg ·mL-1, P0.01) 。在荷瘤小鼠 药效实验中, DSF-NSps 显示出良好的量效关系, 高、中、低剂量的肿瘤抑制率分别为80.22% 、75.14% 和66.10%, 均显 著高于阳性药紫杉醇注射液(55.01%, P0.05); 组织分布实验显示DSF-NSps 主要分布在肝、脾和肿瘤。综上, 将双 硫仑制备成纳米粒后有望成为一种高效的抗肿瘤药物用于乳腺癌的治疗。 关键词: 双硫仑; 乳腺癌; 纳米混悬剂; 抗癌; 药效学 中图分类号: R943 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870(2019)03-0565-09 Preparation of disulfiram naonosuspensions and their anti-tumor efficacy in vitro and in vivo JI Yu-bin1,2# , LIU Biao1,2# , YU Run-qi2,3, WANG Xiang-tao1,2* (1. Research Center on Life Sciences and Environmental Sciences, Harbin University of Commerce China, Har