响应面法优化微量热仪中葡萄糖氧化酶催化反应的条件-食品科学.PDF

166 2012, Vol.33, No.23 食品科学 ※生物工程 * 张成楠，徐 斐 ，曹 慧，于劲松 (上海理工大学食品安全研究所，上海 200093) 摘 要：利用微量热仪Micro DSC Ⅲ，以葡萄糖氧化酶催化氧化葡萄糖的反应放热为评价指标，在单因素和中心 旋转组合试验设计结果的基础上，通过响应面法优化葡萄糖氧化酶催化反应的工艺条件。3个因素对葡萄糖氧化酶 催化产热的影响依次为：酶添加量＞pH值＞反应温度。响应面法分析显示，葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖的最佳工艺 参数为：反应温度35 ℃、pH4.46 、酶添加量1.58mg/mL，总的反应热为39.6668J ，与预测值40.1071J 的相对误差为 1.11%。经响应面法研究所得回归模型显著。 ：微量热法；葡萄糖氧化酶；响应面 Optimization of Catalytic Reaction Conditions for Glucose Oxidase in Microcalorimeter by Response Surface Methodology * ZHANG Cheng-nan ，XU Fei ，CAO Hui，YU Jin-song (Institute of Food Safety, University of Shanghai for Science and Technology, Shanghai 200093, China) Abstract ：Response surface methodology based on a central composite design was used to optimize catalytic reaction conditions for glucose oxidase in micro-differential scanning calorimeter (Micro DSC) based on heat release. Three reaction conditions in decreasing order of their effects on heat release were enzyme dosage, pH and reaction temperature and their optimal values were 1.58 mg/mL, 4.46 and 35 ℃, respectively. Under these conditions, the observed total heat release was 39.6668 J, and the relative error was 1.11% compared with 40.1071 J of the predicted value. The fi tted regression model was statistically signifi cant.v Key words ：microcalorimetric method ；glucose oxidase ；response surface methodology 中图分类号：TS201.2 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2012)23-0166-05 目前，在农业及食品的生产中农药作为杀虫剂或杀 酶催化乙酰胆碱水解和丁酰胆碱水解的反应放热量分别 菌剂被广泛使用。由于其可以通过食品对人和动物产生 为－1.17kJ/mol和－1.6kJ/mol，热量极小[4-5] ，阻碍了量热 毒性及其残留时间较长，因此，严格限制农药在食品中 式酶传感器的发展，因此提高生化体