课件：产气荚膜梭状芽孢杆菌检验.ppt

检验程序—续 36℃，18～24h 36℃，24h ＋ 46℃,2～5h 爆发酵 无 6、说明 1．活菌计数培养 ：1：10稀释的样品用蛋白胨水依次 稀释至10-2－10-6倍，取1ml放入2个平板，分别加 15ml SPS琼脂，于36℃培养24h，选取长有30—300 个黑色菌落的平板，计数黑色菌落数。 /course/ fsc/441/resulex10.html 2、证实试验 (1)纯培养：由平板上任取10个黑色菌落，分别接种 FT培养基，于(36±1)℃培养18－24h，大量繁殖。 (2)菌体形态和染色检验：用培养液涂片，革兰氏 染色镜检。产气荚膜梭菌为革兰氏阳性 粗大杆菌，其耐热株有卵形芽孢，位于 菌体中央或近端。 (3)检查动力和硝酸盐还原实验： 用接种环(针)穿刺接种动力—硝酸盐培养基，于(36 ±1)℃培养24h. --判断有无动力--产气荚膜梭菌无动力； --滴加硝酸盐还原试剂“甲萘胺液和对氨基苯磺酸液”各0.5 ml，观察硝酸盐是否被还原--产气荚膜梭菌，能将硝酸盐还原为亚硝酸盐。 ＋ （红色） (4)牛乳乳糖发酵产气“暴发酵”试验： 取生长旺盛的FT培养 液1ml接种于含铁牛乳培养基，在46℃水浴中培养 2h后观察有无“暴发酵”现象。5h内不发酵者为阴性。 －－产气荚膜梭菌发酵乳糖，产酸凝固酪蛋白并大 量产气，呈“暴风雨式发酵”现象，但培养基不变黑。 (5)卵磷脂酶检查试验：用接种环取FT培养液点种于卵黄 琼脂平板(每块平板 至少可接种10点)，于厌氧 培养，观察接种点的变化。产气荚膜梭菌产生卵 磷脂酶，分解卵黄中的卵磷脂，接种点的底部及 周围乳白色的混浊带。 3、菌数计算 根据黑色菌落的计数和证实试验的结果，计算1 g(ml)食品检样的含菌数。 例如：10－4稀释液的平板长有黑色菌落100个，而供做证实试验的10个菌落中有7个被确证为产气荚膜梭菌，则1g(mL)食品检样所含产气荚膜梭菌数为 计算： /course/ fsc/441/resulex10.html 复习题 1、食品中产气荚膜梭菌检验的主要目标就验食品被该菌污染的程度，因此，其检验的重点项目是活菌数测定及证实试验。能引起奶中乳糖暴发酵。 2、对产气荚膜梭菌的检验程序进行说明。 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考，实际情况实际分析 * * 产气荚膜梭菌检验 食品卫生微生物学检验 产气荚膜梭菌检验 Microbiological examination of food hygiene Examination of Clostridium perfringens （魏氏梭菌） 目录 1、概述 2、生物学特性 （菌体形态学特征、 培养特性和抵抗力） 3、毒素与分型 4、培养基和试剂 5、检验程序 6、说明 /.../ 09/uuoeoeoeuoeuuu.html 1、概述 产气荚膜梭状芽孢杆菌 又称魏/卫氏梭菌 分布：自然界广泛存在(创伤感染）。 易污染食品：动物性食品原料 食品加热后未及时冷却，所含耐高温而残余的产气荚膜梭菌芽孢会迅速发芽，大量繁殖，菌数可达数10万/g，食用前又未加热，则有可能引起产气荚膜梭菌食物中毒。 食品中产气荚膜梭菌检验的主要目标是检验食品被该菌污染的程度，其重点项目是活菌数测定及证实试验。 2、生物学特性 1)形态与染色 G+(陈旧培养物阴性菌）无鞭毛可形成荚膜和芽胞的大杆菌 大小：为(1－2)μm X(2－10)μm 。 芽孢：卵圆形位于菌体中央或近端，直径大于菌体的 直径，有的菌株难形成芽胞。 荚膜：在人和动物活体组织内，或在含血清的培养基 内生长时可形成荚膜。 Clostridium perfringens / research/micimm/index.php /research/Images/SarkerSlide.jpg /shouyiweishengwu/图片资料/产气荚膜梭菌.jpg www.uni-ulm.de/.../ Diagnostik/Erreger/c_keim.htm 2)培养特性 *不严格的厌氧 *普通营养琼脂上可生长，若加入葡萄糖、血液则生长更好。 *适宜生长温度为37—47℃。 *生长和繁殖速度极快，在适宜条件下8