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课件:产气荚膜梭状芽孢杆菌检验.ppt
检验程序—续 36℃,18~24h 36℃,24h + 46℃,2~5h 爆发酵 无 6、说明 1.活菌计数培养 :1:10稀释的样品用蛋白胨水依次 稀释至10-2-10-6倍,取1ml放入2个平板,分别加 15ml SPS琼脂,于36℃培养24h,选取长有30—300 个黑色菌落的平板,计数黑色菌落数。 /course/ fsc/441/resulex10.html 2、证实试验 (1)纯培养:由平板上任取10个黑色菌落,分别接种 FT培养基,于(36±1)℃培养18-24h,大量繁殖。 (2)菌体形态和染色检验:用培养液涂片,革兰氏 染色镜检。产气荚膜梭菌为革兰氏阳性 粗大杆菌,其耐热株有卵形芽孢,位于 菌体中央或近端。 (3)检查动力和硝酸盐还原实验: 用接种环(针)穿刺接种动力—硝酸盐培养基,于(36 ±1)℃培养24h. --判断有无动力--产气荚膜梭菌无动力; --滴加硝酸盐还原试剂“甲萘胺液和对氨基苯磺酸液”各0.5 ml,观察硝酸盐是否被还原--产气荚膜梭菌,能将硝酸盐还原为亚硝酸盐。 + (红色) (4)牛乳乳糖发酵产气“暴发酵”试验: 取生长旺盛的FT培养 液1ml接种于含铁牛乳培养基,在46℃水浴中培养 2h后观察有无“暴发酵”现象。5h内不发酵者为阴性。 --产气荚膜梭菌发酵乳糖,产酸凝固酪蛋白并大 量产气,呈“暴风雨式发酵”现象,但培养基不变黑。 (5)卵磷脂酶检查试验:用接种环取FT培养液点种于卵黄 琼脂平板(每块平板 至少可接种10点),于厌氧 培养,观察接种点的变化。产气荚膜梭菌产生卵 磷脂酶,分解卵黄中的卵磷脂,接种点的底部及 周围乳白色的混浊带。 3、菌数计算 根据黑色菌落的计数和证实试验的结果,计算1 g(ml)食品检样的含菌数。 例如:10-4稀释液的平板长有黑色菌落100个,而供做证实试验的10个菌落中有7个被确证为产气荚膜梭菌,则1g(mL)食品检样所含产气荚膜梭菌数为 计算: /course/ fsc/441/resulex10.html 复习题 1、食品中产气荚膜梭菌检验的主要目标就验食品被该菌污染的程度,因此,其检验的重点项目是活菌数测定及证实试验。能引起奶中乳糖暴发酵。 2、对产气荚膜梭菌的检验程序进行说明。 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考,实际情况实际分析 * * 产气荚膜梭菌检验 食品卫生微生物学检验 产气荚膜梭菌检验 Microbiological examination of food hygiene Examination of Clostridium perfringens (魏氏梭菌) 目录 1、概述 2、生物学特性 (菌体形态学特征、 培养特性和抵抗力) 3、毒素与分型 4、培养基和试剂 5、检验程序 6、说明 /.../ 09/uuoeoeoeuoeuuu.html 1、概述 产气荚膜梭状芽孢杆菌 又称魏/卫氏梭菌 分布:自然界广泛存在(创伤感染)。 易污染食品:动物性食品原料 食品加热后未及时冷却,所含耐高温而残余的产气荚膜梭菌芽孢会迅速发芽,大量繁殖,菌数可达数10万/g,食用前又未加热,则有可能引起产气荚膜梭菌食物中毒。 食品中产气荚膜梭菌检验的主要目标是检验食品被该菌污染的程度,其重点项目是活菌数测定及证实试验。 2、生物学特性 1)形态与染色 G+(陈旧培养物阴性菌)无鞭毛可形成荚膜和芽胞的大杆菌 大小:为(1-2)μm X(2-10)μm 。 芽孢:卵圆形位于菌体中央或近端,直径大于菌体的 直径,有的菌株难形成芽胞。 荚膜:在人和动物活体组织内,或在含血清的培养基 内生长时可形成荚膜。 Clostridium perfringens / research/micimm/index.php /research/Images/SarkerSlide.jpg /shouyiweishengwu/图片资料/产气荚膜梭菌.jpg www.uni-ulm.de/.../ Diagnostik/Erreger/c_keim.htm 2)培养特性 *不严格的厌氧 *普通营养琼脂上可生长,若加入葡萄糖、血液则生长更好。 *适宜生长温度为37—47℃。 *生长和繁殖速度极快,在适宜条件下8
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