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- 2019-04-08 发布于天津
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病毒包装与感染资料汇编.ppt
;病毒载体的优势;存在的问题;;;?;腺病毒载体 ;腺病毒系统的包装;慢病毒载体;慢病毒载体的特性; ;HIV-1;慢病毒载体系统组成;表达载体部分与包装成分互补,仅含有包装、逆转录和整合所需的HIV-1顺式作用元件, 5’端LTR和全部5’端非翻译区域。
包膜表达质粒使用水疱性口炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)用来代替了原病毒的env基因。;三代慢病毒载体;lentivirus 包装流程;逆转录病毒载体;逆转录病毒载体的特点;;逆转录病毒载体包装原理;
;第一代包装细胞
基因组整合了仅缺失包装信号的MLV前病毒基因组,包装的病毒颗粒为单嗜性。
将其包膜蛋白env基因换成鼠4070A病毒的双嗜性包膜蛋白,就产生了能分泌双嗜性病毒的包装细胞。但这个细胞系所含的包装结构仅仅缺失Ψ信号,只要它们与载体之间发生一次重组,就可以产生有复制能力的野生型病毒,安全性很差。
第二代包装细胞
前病毒基因组除了包装信号缺失外,5’LTR的5’端顺序也缺失,病毒剪接供体上游部位进一步缺失,3’LTR被SV40的转录终止多聚腺苷酸信号取代。经过这样的改造,包装细胞与载体系列之间的共同顺序只存在于紧接gag起始密码子上游53bp的区域。;
这种包装结构与载体结构至少经过二次独立的重组才能形成有复制能力的野生型病毒,使基因治疗的安全性大大提高。但如用早期的载体进行包装,经长期培养后,仍有野生型病毒产生。
第
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