吉玛重组腺相关病毒操作手册.PDF

吉玛重组腺相关病毒 操作手册 GenePharma Recombinant Adeno-Associated Virus Operation Manual 2017 年 6 月 如有疑问欢迎垂询 上海电话：0218009 E-mail ：rnaisupport@ 苏州电话：05128042 E-mail ：szsupport@ ‐1‐ 目 录 产品简介 3  腺相关病毒载体优势 3  重组腺相关病毒载体不同血清型 4  实验室安全措施 6  流程描述 7  材料与仪器 8  使用方法 9  运输和储存 13  常见问题及解决方案 13  吉玛案例 15  附录 18  如有疑问欢迎垂询 上海电话：0218009 E-mail ：rnaisupport@ 苏州电话：05128042 E-mail ：szsupport@ ‐2‐ 产品简介 腺相关病毒属微小病毒科( parvovirus)，为无包膜的单链线状 DNA 病毒。AAV 的基因组约 4700bp ，包括上下游两个开放读码框架(ORF)，位于分别由 145 个核苷 酸 组成的 2 个反向末端重复序列(ITR)之间。 基因组中有 3 个启动子(P5 、P19 和 P40) 和 2 个开放阅读读框(ORF) ，rep 和 cap ，如下图所示。 rep 编码 4 个重叠的多功能蛋白，即 Rep78 、Rep68 、Rep52 和 Rep40 ，其中 Rep78 与 Rep68 参与 AAV 的复制与整合，Rep52 和 Rep40 具有解螺旋 酶和 ATP 酶 活性，与 Rep78 、Rep68 共同参与单链基因组的复制；cap 编码的 VP1 、 VP2 、VP3 是 装配成完整病毒所需要的衣壳蛋白，它们在 AAV 病毒整合、复制和装 配中其重要作 用。 腺相关病毒载体优势 1. 安全性高：迄今从未发现野生型AAV 对人体致病，重组AAV 基因组