南京大学分子生物学第19讲.pptVIP

（三） ?噬菌体的阻遏蛋白及其作用 1，Cro蛋白 （1）与操作子结合的亲和力 （2）功能 2，CI蛋白 （1）与操作子结合的亲和力 （2）功能 （3）cI基因的突变效应 （四） CII蛋白和CIII蛋白 1，CII蛋白 （1）CII蛋白的特点 A，以寡聚体形式起作用 B，促进启动子PE、PI和PaQ的转录 （2）CII蛋白调控的启动子的特点 2，CIII蛋白 3， ?噬菌体cII、cIII基因突变效应 （五）抗终止因子及其作用（P206） 1，N蛋白 （1）作用位点（图6-17） （2）作用机制 2，Q蛋白 （1）作用位点 （2）作用 （五） ?噬菌体溶原生长的基因表达调控 ?噬菌体的溶原生长分三个阶段 1，溶原化的建立 （1）早期基因的表达 （2）营养耗竭的影响 A，对寄主的影响 B，对CII蛋白的影响 （3）MOI值过高的影响 A，MOI值 B， MOI值过高（MOI≥10）对CII蛋白的影响 C，从PE转录CⅠ基因体制的建立 2，溶原化的维持 （1）PE体制向PM体制的转换 （2）溶原化的维持 3， ?原噬菌体的释放 （1）当溶原细菌受到紫外线等作用引起DNA损伤时RecA切断CI蛋白单体，失去阻遏活性 （2）早期操纵元转录 （六）?噬菌体溶菌生长的基因表达调控 1，感染细菌立即进入溶菌生长的基因表达调控 （1）早期基因的表达调控 （2）晚期基因的表达调 2，从溶原化状态进入溶菌生长的基因表达调控 （1）早期基因的表达调控 （2）晚期基因的表达调控 第六节 基因转录的翻译调控——衰减子系统 一、概述 1，阻遏蛋白调控系统对trp酶系统转录活性的影响 2，衰减子系统对trp酶系统活性的影响 3，衰减子系统存在的意义 二、 trp衰减子的作用机制 （一）trp mRNA的前导序列的结构（图8－23） 1，有一个编码14个Aa（前导肽）的ORF，其5‘端有S-D序列 2，前导肽mRNA中有两个连续的Trp密码子 3，前导肽ORF下游42个碱基处有一个不依赖ρ因子的终止子（衰减子序列） （二）衰减子的作用机制 1，trp mRNA前导序列的二级结构（图8－24） 2， trp mRNA前导序列转录与翻译的时空关系 3，Trp对衰减子作用的影响（图8－25） （1）Trp存在时（图8－25，a） 核糖体可以完成前导肽的翻译，到达终止密码，占据序列1和部分序列2 序列3、4配对，终止子结构形成， trp mRNA转录终止 （2）Trp（或Arg）饥饿时（图8－25，b） 核糖体停顿在Trp密码子上，占据序列1，此时序列4尚未转录出来 序列2、3配对，终止子结构不能形成， trp mRNA转录继续 （3）其他Aa（如Gly）饥饿时（图8－25，c） 序列1、2配对，序列3、4配对，终止子结构形成， trp mRNA转录终止 4，Trp衰减子模型的实验证据 降低Trp衰减子转录终止作用的突变降低Trp酶系统的表达，反之则增强Trp酶系统的表达 三、衰减子的普遍性及其生物学意义 1，普遍性 （1）结构共性 ORF，终止子序列，相应Aa的密码子，可能存在的的二极结构 （2）作用机制共性 前导肽翻译作用不存在时，转录在衰减子处终止 2，衰减子的作用机制可被看作是一种可阻遏的正调控 激活物：核糖体 辅阻遏物：相应的氨酰基-tRNA 3，衰减子调控的生物学意义 （1）调控更为灵敏 （2）对代谢产物的反应更为直接 （3）调控更为精细 四、负责核苷酸合成的基因的衰减子 （一）天门冬氨酸转氨甲酰酶操纵元（pyr BI操纵元）前导序列结构 1，长度 160个核苷酸 2，ORF 从21位开始，编码44个Aa的前导肽 3，暂停位点 由位于60位核苷酸附近的发夹结构和第85位核苷酸附近的一串U组成 4，不依赖于ρ因子的终止子 在第120个核苷酸附近 5，前导肽的终止密码子 位于终止子下游25个核苷酸处 （二）pyr BI操纵元衰减子作用的机制（图8－26） 1， UTP含量较低时 RNA聚合酶在暂停位点的一连串U处发生较长时间的停顿 核糖体追赶上RNA聚合酶，与之发生作用，结束RNA聚合酶的延宕 耦联核糖体的RNA聚合酶继续转录，到达终止子结构时不发生终止作用，pyrB、I基因得以转录 2，UTP充足时 RNA聚合酶在暂停位点不发生长时间的延宕 核糖体不能追赶上RNA聚合酶 RNA聚合酶继续转录，到达终止子结构时发生转录终止作用，pyrB、I基因不能转录 第七节 翻译水平的调控 一、反义RNA的调控作用 （一）micRNA （mRNA -interfering complementary RNA）及其作用位点 1，micRNA 干扰mRNA的互补RNA 2，micRNA的作用位点 通常是mRNA上的S-D序列，起始密码子和部分N端的密码子 3，反义RNA