临床医学毕业牦牛中性粒细胞防御素的分离纯化及抗菌活性.docVIP

牦牛中性粒细胞防御素的分离纯化及抗菌活性 姓 名： 2014年6月25日 作者：董开忠，余四九，杨具田，王冬梅，蔡勇，雒晓芳 【摘要】 目的：分离牦牛中性粒细胞(PMN)防御素并检测其抗菌活性。 方法：运用Percoll密度梯度离心法，从新鲜牦牛全血中分离纯化牦牛中性粒细 胞，用50 mL/L冰乙酸抽提，提取液经Bio Gel P 10聚丙烯酰胺凝胶过滤和反 相高效液相色谱(RP HPLC)分离纯化，对活性多肽进行质谱分析，并对其中3 个肽进行氨基酸组成分析，用琼脂弥散法检测三种多肽的抗菌活性。结果：获得 13种活性多肽，其中三个肽为牦牛屮性粒细胞防御素1?3,并具有很强的抗菌 活性。结论:PMN存在防御素并具有广谱抗菌活性，在天然免疫中发挥着重要作 用O 【关键词】牦牛；分离纯化；中性粒细胞；防御素 [Abstract] AIM: To isolate and purify p defensin from the neutrophils of Yak. METHODS: The method of percoll gradient centrifugation was employed to purify neutrophils from Yak peripheral blood. The crude extraction from Yak neutrophils was i