生化实验基本操作学习课件.pptVIP

（6）洗涤：用过的吸管要另放好，不能跟干净的吸管同放，混淆不清，待做完实验后要清洗。 精品 (三)溶液的混匀 样品与试剂的混匀是保证化学反应充分进行地一种有效措施。为使反应体系内各物质迅速地相互接触，必须借助于外加的机械作用。混匀时须防止容器内液体溅出或被污染。严禁用手指直接堵塞试管口或锥形瓶口振摇。混匀的手法有以下几种，可随使用的器皿和液体容量而选择。 精品 1．玻棒搅动法 适用于烧杯内容物的混匀，如固体试剂的溶解和混匀。 2．吸量管混匀法 用吸管将溶液反复吸放数次，使溶液充分混匀。 精品 3．倒转混匀法 适用于有塞量筒和容量瓶、试管内容物的混匀。一般试管内容物的混匀可用聚乙烯等薄膜封口，再用手按住管口倒转混匀。 精品 4．指弹混匀法 左手持试管上端多用右手指轻轻弹动试管下部，使管内溶液作旋涡运动。 5．旋转混匀法 用手持容器，使溶液作离心旋转，适用于未盛满液体的试管或小口器皿，如锥形瓶。旋转试管时最好用手腕旋转。 精品 6．甩动棍匀法 右手持试管上部轻轻甩动振摇，即可混匀。 7．电磁搅拌混匀法 在电磁搅拌机上放置烧杯梦在烧杯内放入封闭于玻璃或塑料管中的小铁棒，利用磁力使小铁棒旋转以达到混匀杯中液体的目的。适用于酸碱自动滴定，pH梯度滴定等。 精品 8．振荡器混匀法 利用振荡器使容器中的内容物振荡，达到混匀的目的。 精品 二、基本技术及应用 （一）分 光 光 度 法 技 术 精品 物质对光线有选择性的吸收作用。不同物质由于其分子结构不同，对不同波长光线的吸收能力也不同。因此，每种物质都具有其特异吸收光谱。根据物质的吸收光谱进行定性或定量分析的方法称为吸收光谱法，或分光光度法。该法所用的仪器称为分光光度计或吸收光谱仪。 精品 分光光度法具有操作简便，快速等特点，它是生物化学分析的重要手段之一，也是其他学科进行分析研究的重要手段之一，对医学生来说是一项重要的操作技术。 精品 原理 分光光度法作为定量分析的基本依据是Lambert-Beer定律，他们根据一系列的实验证明：当一束单色光通过溶液介质时，部分光能被溶液吸收。吸收的比值（透射光/入射光）和入射光的强度无关，但与介质的厚度及介质的浓度成正比。 精品 A=KCL 当溶液厚度(L)不变时，对于不同浓度的同一物质和同样波长的单色光（即消光系数不变)，溶液的吸光度和溶液的浓度成正比： A1/A2=C1/C2 → C1=A1×C2/A2 精品 式中C2为标准液的浓度，可根据测得的吸光度值，按公式（3）求得待测溶液的浓度(C1)。 实际工作中为简便起见，常常事先测定一系列不同浓度的标准管，然后以吸光度对标准浓度作图，得到标准曲线，测得待测物质的吸光度后，可(从)标准曲线上查出。 精品 实验一 生化实验基本操作 临床生物化学与分子生物学教研室 精品 生物化学基本技术及应用 一、实验常识 （一）、实验室规则及安全及防护知识 1．自觉地遵守课堂纪律，维护课堂秩序，保持室内安静。必须穿白大褂，不能穿背心、拖鞋进入实验室。 精品 2．要认真、严肃、积极、主动地做实验，要听从教师的指导。实验过程中要认真做好观察、记录。完成实验后经教师检查同意，方可离开。实验完成后要及时的按要求完成实验报告。 精品 3．注意保持实验室的整洁。实验完毕，须将药品试剂排列整齐，仪器要放好，将实验台面抹拭干净。使用后的玻璃仪器要清洗干净放好。 精品 4．要爱护实验仪器，节约使用各种试剂、物品。使用仪器时，应小心仔细，防止损坏仪器。使用贵重精密仪器时，应严格遵守操作规程，发现故障立即报告教师，不要自己动手检修。仪器损坏时，应如实向教师报告。 精品 5．废弃液体(强酸强碱溶液必须先用水稀释)可倒入水槽内，同时放水冲走。废纸及其他固体废物和带有渣滓沉淀的废液都应倒入指定的垃圾筐内，不得倒入水槽或到处乱扔。 精品 6．对实验的内容和安排不合理的地方可提出改进意见。对实验中出现的一切反常现象应进行讨论，并大胆提出自己的看法，做到生动、活泼、主动地学习。 精品 7．使用电器设备(如恒温水浴、离心机、电炉等)时，严防触电；绝不可用湿手或在眼睛旁视时开关电闸和电器开关。检查电器设备是否漏电应用试电笔或手背触及仪器表面。凡是漏电的仪器一律不能使用。 精品 8．可燃物，特别是易燃物(如乙醚、丙酮、乙醇、苯等)时，应特别小心。不要大量放在桌上，更不应放在近火焰处。低沸点的有机溶剂不准在火焰上直接加热，只能在水浴上利用回流冷凝管加热或蒸馏。 精品 9．使用浓酸、浓碱，必须极为小心地操作，防止溅失。用吸量管取这些试剂时，必须使用橡皮球，绝对不能用口吸。若不慎溅在实验台或地面，必须及时用湿抹布擦洗干净。如果触及皮肤，应立即治疗。 精品 10．如果不慎倾出了相当量的易燃液体，则应按下法处理：(1)