第七章微生物的遗传变异和育种教材编辑.ppt

定义：受体菌直接吸收来自供体菌的DNA片段而获得部分新的遗传性状的现象，称为转化。接受了供体菌DNA的受体菌称为转化子（transformant）。 过程：受体菌吸收了来自供体菌的DNA片段，通过交换，把它整合到自己的基因组中，再经复制就使自己变成一个转化子。 抑制剂：脱氧核糖核酸酶 意义：现代生物学发展史上的一个里程碑，促进了分子生物学的建立和发展 2、转化 受体菌直接吸收来自供体菌的DNA片段，通过交换，将其整合到自己的基因组中，再经复制就使自己变成一个转化子。 这种受体菌接受供体菌的DNA片段而获得部分新的遗传性状的现象，称转化或转化作用。 转化的条件: ①两菌株的亲缘关系应接近 ②受体细胞要处于感受态。 ③供体DNA片段大小适宜，分子量小于1× 107 D ④环境条件 在R型活菌的协助下， S型死菌死灰复燃 2、转化发生的条件： ①两菌株的亲缘关系应接近 两个菌种或菌株之间能否发生转化，与它们在进化过程中的亲缘关系有着密切的关系。但即使在转化率极高的菌种中，其不同菌株间也不一定都能发生转化。 ②受体细胞要处于感受态 感受态：competence，受体细胞能从环境吸取外源DNA片段并实现其转化的一种生理状态 ③供体DNA片段（转化因子）大小适宜，分子量一般为1× 107 D 左右 ④适当的环境条件 感受态由细胞的遗传性决定，但同时也受环境因子的影响：cAMP、Ca2+等最明显。cAMP可使嗜血杆菌细胞群体的感受态水平提高一万倍。 感受态因子 一种胞外蛋白质，分子量为5～10kD 其作用为： 催化转化，促进外来DNA片段吸收 可降解细胞表面某种成分，使DNA受体暴露 1）不同菌细胞DNA受体位点不同 2）有的菌感受态因子只对同种菌起作用 转化的条件: ①两菌株的亲缘关系应接近 ②受体细胞要处于感受态。 ③供体DNA片段大小适宜，分子量小于1× 107 D ④环境条件 转化因子的本质是供体DNA片段 一般为线状或闭合环状；单链或双链； 转化的频率往往很低，一般为0.1～1%。 据研究，呈质粒形式（双链闭合环状）的 转化因子，其转化频率最高 ◆转化因子的本质一般是DNA，经多次提纯操作后，每一转化DNA片段的分子量都小于1×107，约占细菌核染色体组的0.3%。据研究，呈质粒形式的转化因子，其转化频率最高；一般的转化因子都是线状双链DNA；也有线状单链DNA具有转化作用的报道。 （1）转化模型： （2）环境中发生的自然转化 细菌生长到一定阶段时分泌感受态因子→感受态因子与细胞表面受体作用，诱导感受态—特异蛋白 转化过程：以S. Pneumonia为例分为六阶段： 1★双链DNA片段与感受态受体菌细胞表面的特定位点（主要在新形成细胞壁的赤道区）结合； 2★在吸附位点上的DNA被核酸内切酶分解，形成平均分子量为4~5×106的DNA片段； 3★DNA双链中的一条单链被膜上的另一种核酸酶切除，另一条单链逐步进入细胞，这是一个耗能的过程。分子量小于5×105的DNA片段不能进入细胞。 4★来自供体菌的单链DNA片段在细胞内与受体细胞核染色体组上的同源区配对交换，形成了一个杂合DNA区段（heterozygous region）。在这一过程中，有核酸酶、DNA聚合酶和DNA连接酶的参与； 5★受体菌的染色体组进行复制，杂合区段分离成两个，其中之一获得了供体菌的转化基因，另一个未获供体基因； 6★当细胞发生分裂后，一个子细胞含供体基因，这就是转化子；另一个细胞与原始受体菌一样。 转化或转化作用：受体菌（recipient或receptor）直接吸收了来自供体菌（donor）的DNA片段，通过交换整合到自己的基因组中，从而获得部分新的遗传型状的现象。接受了供体菌DNA的受体菌称为转化子（transformant）。 范围：原核生物中，转化是一个较普遍的现象。 若干放线菌和蓝细菌及少数真核微生物也有转化报道。 转化发生的条件 两个菌种或菌株之间能否发生转化，与它们在进化过程中的亲缘关系有着密切的关系。但即使在转化率极高的那些种中，其不同菌株间也不一定都可发生转化。 进行转化的受体细胞必须处于感受态（competence），亦即受体细胞最易接受外源DNA片段并实现其转化的一种生理状态。 感受态因子：细胞外蛋白，可催化外来DNA分子的吸收或降解细胞表面某种成分，以让细胞表面的DNA受体显露出来；也可能是一种自溶酶。对不同细菌，每个细胞上的DNA结合位点数不同。 转化因子的本质一般是DNA，经多次