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二、自主学习 1.单克隆抗体的制备和应用 2.单克隆抗体的制备过程 3.动物融合的过程 四、合作探究 比较植物、动物细胞融合 细胞膜的流动性 灭活病毒、PEG、电激等 融合后的细胞进行有丝分裂,形成完整的杂交细胞 诱导的手段? 融合后细胞的类型? AB杂种细胞遗传物质 有什么特点? 三种AA、AB、BB(A、B) 含两种生物的遗传物质 动物细胞融合过程 原理? 物理法的融合效率较高,且对细胞(原生质体)的伤害小,易操作、控制和观察。 太空中处于失重状态,不同种细胞(原生质体)更容易亲近; 为什么在太空中细胞(原生质体)融合率会大大上升?为什么选用物理法诱导? 2、动物细胞融合的应用 1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。 2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、 人—鸡、人—蛙、酵母菌—鸡 、人—胡萝卜等 3、重要用途:制备单克隆抗体。 获得杂种植株 物理、化学方法 (同左) 灭活的病毒 物理(离心、振 荡、电激) 化学(聚乙二醇) 直接诱 导细胞融合 去壁—原生质体 融合—诱导新壁 —杂种植株 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 结果 诱导方法 步骤 融合的原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 获得杂交细胞 五、才华展示 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 ( ) A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点( ) 具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁 【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是( ) A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 B B A 使用相应的抗体检测乙肝病毒——抗原 (二)、单克隆抗体的制备 医院一般怎样检测人体内是否存在乙肝病毒? 乙肝病毒模式图 凡能够引起机体产生特异性 免疫应答的物质叫做抗原。 1、什么是抗原? 例如花粉、病菌、病毒等。有时自身的组织或细胞也会成为抗原,如癌细胞等。 抗原决定簇: 抗原表面具有的某些特定的化学基团,能决定抗原特异性,是免疫细胞识别抗原的重要依据。 各种抗原的决定簇数目不同,同一抗原的决定簇可能有多种。 2、什么是抗体?由何种细胞产生?主要分布在哪里?起何作用? 当机体受到抗原刺激剂后由效应B细胞(浆细胞)产生的,并且能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白——抗体。 抗体分布于血清中,也分布于组织液及外分泌液中。 抗体与相应抗原特异性结合 抗体由何种细胞产生?主要分布在哪里? 3、抗体的传统生产方法: 从血清中分离抗体 多种浆细胞 动物体内 多种抗体 抗原 血清抗体(也称多克隆抗体) 由血清中提取的抗体是由不同淋巴细胞产生的多种抗体的混合物,可达百万种以上,称为多克隆抗体。 特点: 产量低、纯度低、特异性差、反应不够灵敏。 抗原不纯 抗体不纯 抗原 动物体内 刺激 效应B 抗体 每一个B淋巴细胞只分泌一种化学性质单一,特异性强的抗体。 如果利用单个B淋巴细胞进行无性繁殖(克隆),形成细胞群,这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体——单克隆抗体。 问题: 怎样获得化学性质单一、特异性强的抗体呢? 在体外培养的条件下,一个B淋巴细胞能无限增殖形成细胞群吗? 什么样的细胞能够在体外无限增殖呢? ——肿瘤细胞! ?抗体 ?抗原 ?应答 ?抗体的不纯性 动物细胞受到抗原刺激,引起免疫反应产生的球蛋白. 不是自己的而又能引起免疫应答反应的物质就是抗原. 一种抗原有多种不同的决定簇,刺激的是多种B细胞,作用于不同的B细胞后,会产生多种抗体, 这是多克隆的, 故不纯! 4.制备单克隆抗体的思路 抗原 B细胞 浆细胞 抗体 刺激 ?怎么才能得到纯的抗体? ?光纯还不行,还要大量.怎么办? ?但,有问题: ?找,什么细胞能无限繁殖呢? ?思路就出来了: 要想获单一的纯抗体,就必须从一个B细胞出发. 让B细胞大量繁殖(克隆)就可以产生大量抗体了. B细胞是不能无限繁殖的.怎么办? 癌
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