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微生物的遗传变异与育种 遗传与变异的概念 遗传和变异是生物体的最本质的属性之一。 遗传(heredity):亲代生物的性状在子代得到表现;亲代生物传递给子代一套实现与其相同形状的遗传信息。特点:具稳定性。 遗传型(genotype):又称基因型,指某一生物个体所含有的全部基因的总和;------是一种内在可能性或潜力。 遗传型 + 环境条件 表型 表型(phenotype):指生物体所具有的一切外表特征和内在特性的总和;------是一种现实存在,是具一定遗传型的生物在一定条件下所表现出的具体性状。 第一节 遗传变异的物质基础 种质连续理论:1883~1889年间Weissmann提出。认为遗传物质是一种具有特定分子结构的化合物。 基因学说:1933年摩尔根(Thomas Hunt Morgan)发现了染色体,并证明基因在染色体上呈直线排列,提出了基因学说,使得遗传物质基础的范围缩小到染色体上。 但染色体是由核酸和蛋白质两种长链高分子组成。20多种氨基酸经过不同排列组合,可以演变出的蛋白质数目几乎可以达到一个天文数字,而核酸的组成却简单得多,一般仅由4种不同的核苷酸组成,它们通过排列核组合只能产生较少种类的核酸,因此当时认为决定生物遗传型的染色体和基因的起活性成分是蛋白质。 第一节 遗传变异的物质基础 DNA是遗传变异的物质基础的证明: 1944年以后,先后有利用微生物为实验对象进行的三个著名实验的论证(肺炎球菌的转化试验、噬菌体感染试验、病毒的拆开与重建试验),才使人们普遍接受核酸才是真正的遗传物质。 一、证明核酸是遗传物质基础的三个经典实验 (一)经典转化实验 (transformation):F.Griffith, 研究对象:Streptococcus pneumoniae(肺炎链球菌) S型菌株:有荚膜,菌落表面光滑,有致病性 R型菌株:无荚膜,菌落表面粗糙,无致病性 Griffith转化试验示意 (2)细菌培养实验 ①加S菌DNA ②加S菌DNA及DNA酶以外的酶 ③加S菌的DNA和DNA酶 ④加S菌的RNA ⑤加S菌的蛋白质 ⑥加S菌的荚膜多糖 (二)噬菌体感染实验 A. D. Hershey和M. Chase, 1952年 以32S标记蛋白质外壳做噬菌体感染实验 (2)含35S-蛋白质的一组:放射性75%在上清液中 (三)植物病毒的重建实验 为了证明核酸是遗传物质,H. Fraenkel-Conrat(1956)用含RNA的烟草花叶病毒(TMV)进行了著名的植物病毒重建实验。 将TMV在一定浓度的苯酚溶液中振荡,就能将其蛋白质外壳与RNA核心相分离。分离后的RNA在没有蛋白质包裹的情况下,也能感染烟草并使其患典型症状,而且在病斑中还能分离出正常病毒粒子。 选用TMV和霍氏车前花叶病毒(HRV),分别拆分取得各自的RNA和蛋白质,将两种RNA分别与对方的蛋白质外壳重建形成两种杂合病毒: (1)RNA(TMV)- 蛋白质(HRV)(2)RNA(HRV)- 蛋白质(TMV) (二)、原核生物的质粒 定义:是一类小型闭合环状核外双螺旋DNA分子,能独立于细胞核进行自主复制。 大小:约为2-100×106Dalton,上面携带有数个到数十个甚至上百个基因。 质粒性质: ①存在形式:可以在细胞质中独立于染色体之外独立存在(游离态),也可以通过交换掺入染色体上,以附加体(episome)的形式存在; ②质粒是一种复制子(replicon), 严紧型质粒的复制受细胞核控制,与染色体DNA复制相伴随,一般一个寄主细胞内只有少数几个(1~5)个拷贝; 松弛型质粒的复制不受细胞核控制,在染色体DNA复制停止的情况下仍可以进行复制,在细胞内的数量可以达到10~200个或更多。 第二节 基因突变与诱变育种 一、基因突变 基因突变 ——即突变,泛指细胞内 (或病毒体内) 遗传物质的分子结构或数量突然发生的可遗传的变化,可自发或诱导产生。 狭义的突变:基因突变(点突变) 广义的突变:基因突变和染色体畸变 野生型菌株、突变株 (一)突变类型: 温度敏感型突变 (二)突变的特点: 1)不对应性:环境与变异无对应性 2)自发性:非人为的诱变因素下发生 3)稀有性:生物体的自发突变率为10-6~10-9 4)独立性:一个基因的突变对其它基因突变无影响 5)诱变性:诱变剂可提高突变率10~105倍 6)稳定性:突变性状稳定、可遗传 7)可逆性:有回复突变 二、突变与育种 (一)自发突变与生产育种 (二)诱变育种 1. 概念: 诱变育种是用物理或化学的诱变剂使诱变对象内的遗传物质(DN
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