壹前言-东海大学机构典藏系统.PDF

壹、 前言 植物內生真菌是一種生長在植物莖葉當中，沒有明顯生活週期或是病徵的真 菌，在自然界中具有重要的生態作用。大部份內生真菌與寄主會產生互利共生的 現象，為了保護寄主及本體自身的安全，往往會產生一些具有生物活性，例如抗 菌、抗蟲害等的二次代謝物質。1993 年美國科學家Strierle 從太平洋短葉紅豆杉分 離出可產生紅豆杉醇Taxol 的真菌菌株Taxomyces andrenae，激發了研究內生真菌 生物活性物質的熱潮。 食品製造業使用許多化學合成的食品保存劑，這些化學物質往往會造成食品 安全上的疑慮，例如亞硝酸鹽會形成致癌物質。因此基於安全性的考量，從自然 的材料當中開發天然之生物保存劑已成為必然的趨勢。 本實驗的主要目的是從本土植物中所分離出的內生真菌之代謝物質當中，經 由分析純化出具有抑制病原細菌、真菌的生長，或是可以抑制癌細胞生長等生物 活性的物質，期望能開發新的食品保存劑或新的藥物。 1 貳、文獻回顧 在許多已知的自然產物中，微生物扮演著一個具有豐富活性代謝物質的來源， 從微生物中萃取得到的代謝物質具有廣泛的應用性，例如：抗生素、免疫抑制劑及 抗癌劑等…。在過去四年中已經發現有超過 230 多種的二次代謝物質從 70 多種與 植物相關聯的微生物中分離出來，包括結構式、活性以及與寄主植物間的關係也一 一被研究透徹，而其中又以內生真菌為一種新興起的活性物質來源 (Gunatilaka et al., 2006)。 一、內生真菌簡介 （一）內生真菌定義及研究歷史 內生真菌是一種廣泛存在於草類和木本植物之植物體內部的真菌，與腐生真 菌不同的是它們能夠造成植物系統性的感染，但暫時性不會引起寄主之外表病徵 或造成明顯的傷害 (Wang et al., 2002)。 在十九世紀首度在禾本科植物的葉片中發現內生真菌的存在開始，便展開 一連串對於內生真菌的研究，初期多著重於將內生真菌從植物本體分離、體外培 養和內生真菌的親緣鑑定與分類，對於它們與寄主之間的關係也是一研究的方向 (Lewis et al., 1924)；之後將內生菌的範圍縮小為不引起植物寄主外表明顯病徵 者，藉此排除掉一些腐生真菌的種類 (Carrol et al., 1986)。進一步研究發現內生 真菌在生長過程中所分泌的某些二次代謝物不僅僅只是應用在與寄主間的交互 作用，例如禾本植物多與其內生真菌行互利共生關係，而是對食草動物本體消 化、免疫等系統也會產生影響 (Clay et al., 1989)；較具突破性的發展是美國蒙大 拿州立大學的研究學者從短葉紅豆杉的韌皮部分離到一株內生真菌 Taxomyces andreanae，此菌可以產生與寄主樹皮當中所分離出的抗癌藥物Taxol 結構相同的 二次代謝物質，經由動物及臨床實驗證明對於乳癌及卵巢癌有治療效果，此發現 使得內生真菌一躍成為產生對抗人類疾病藥物的新天然研究來源 (Stierle et al., 1993)。近年來對於內生真菌二次代謝物質活性的研究與日俱增，藉由簡易的化 2 學法萃取，期望從中開發新的醫用藥物、抗生素以及食品添加物。 （二）內生真菌特性 根據內生真菌與寄主的關係將其分成草本及木本植物兩個部分 (Weber et al., 2004)： 1. 草本植物內生真菌 草本植物多與其內生真菌行互利共生的途徑，有些於共生期間會產生毒性二 次代謝物質以保護寄主避免草食動物的啃食。內生真菌會分泌一些真菌毒素 (mycotoxin) 來幫助寄主抵抗病蟲害 (Agee et al., 1994) ，另外還可增強植物忍受 逆境的能力。而內生真菌需要從植物體內吸取少量養分，以供生存所需之用，比 較有名的是 Neotyphodium sp.，透過促進植株根系發育、葉片生長及氣孔開關等作 用，可以提高禾本植物寄主本身的抗旱性 (李，2006)。 2. 木本植物內生真菌 木本植物因體積較大的關係通常會同時被幾種內生真菌寄生，有些內生真菌