海洋微藻抗菌活性藻株筛选及其活性物质分离纯化研究-发酵工程专业论文.docxVIP

天津商业大学硕士学位论文摘要 天津商业大学硕士学位论文 摘要 酎药性逐渐成为2l世纪威胁人类健康的一大因素，故开发新的抗菌资源迫在眉睫。近 年来，由于具有丰富的生物活性物质，微藻及其代谢物的研究逐步成为世界各国科学家的 研究热点。本文采用琼脂扩散法测定-j9种微藻不同溶剂提取物的抗菌活性，筛选出目标 藻株进行优化培养，并对其抗菌活性物质进行了分离纯化研究。 本文采用琼脂扩散法测定了9种微藻不同溶剂提取物的抗菌活性。结果显示：(I)9种 微藻不同溶剂提取物均显示了不同程度的抗菌活性，尤其是球等鞭会藻H29，球等鞭会藻 3011，球等鞭金藻8701，牟氏角毛藻，扁藻和小球藻具有良好的广谱抗菌活性，且其营养 要求简单，易培养，具有巨大的开发潜力。 (2)在所受试的微藻提取物中，66．67％的具 有抗金黄色葡萄球菌活性的样品仍具有抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性，尤其是球等鞭 金藻H29、牟式角毛藻、蓝隐藻、球等鞭金藻8701和扁藻的不同溶剂提取物具有良好的抗 MRSA活性，表明微藻可能是开发抗MRSA物质的潜在资源。(3)球等鞭会藻H29丙酮提 取物对革兰氏阴性菌(大肠杆菌)和革兰氏阳性菌(枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌)均 有抑制作用，且其对MRSA的抑制作用是万古霉素(48$xg／mL)抗MRSA作用的一半， 表明-丌发球等鞭金藻H29中的抗菌物质具有广泛的前景。 目前，球等鞭金藻H29的细胞培养密度较低，不利于其活性物质的分离制备。故本实验 以舵培养基为基础，采用正交试验方法对其培养条件进行了优化。其最佳培养条件为：(1) 温度为25C，光通量在5000Lux，pH在8时内生长最好。(2)NaN03、NaH2P04、FeC6H．{07、 NaCI的浓度依次为37．5 mg／L、4．4 mg／L、3．9 g／L、23 g／L，且其余营养成分与f，2培养基 相同时，球等鞭金藻H29生长最好，生物量达到1．359／L。 以球等鞭金藻H29藻粉的丙酮粗提物为材料，经过反复柱层析，最后分离到两种抗菌物 质Ll和L2，它们对耐甲氧西林会黄色葡萄球菌的MIC分别为150 Stg／mL和100 Stg／mL， L2对大肠杆菌的MIC为10Stg／mL。根据紫外光谱和质谱结果分析，化合物Ll可能为醌类 化合物，化合物L2的分子量为274，其可能为硫醚类化合物，具体结构需要进一步研究。 关键词：球等鞭会藻：微藻：抗菌活性：筛选；分离纯化：耐甲氧西林会黄色葡萄球菌 天津商业大学硕士学位论文 天津商业大学硕士学位论文 Abstracts Drug-resistance of microorganisms has becoming one of the factors threatening the health of human in 21 century．Therefore，exploiting new anti·microbial compounds is emergent．The research on microalgaes and its metabolisms is becoming hot topic around the world recently．In this article，we mainly study the anti·microbial activities of different solvent extracts of 10 microalgaes using agar diffusion method，optimizing the cultural conditions，isolation and purification of the target microalgae． The anti—microbial activities of differently solvent extracts from nine microalgaes were investigated in this article，via agar diffusion method．The results showed that：(1)Different solvent extracts from ten microalgaes indicated different degrees of anti·microbial activities against tested microorganisms．Especially,Isochrysis galbana Parke H29，lsochrysis galbana Parke 8701，Isochrysisgalbana Parke 3011，Chaeloceros muelleri，