猪瘟兔化弱毒疫苗——半个世纪的回顾仇华吉童光志.DOCVIP

猪瘟兔化弱毒疫苗——半个世纪的回顾 仇华吉，童光志，沈荣显 (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室，哈尔滨150001) 猪瘟是养猪业的一种毁灭性传染病，几乎遍及全世界(除北美洲和大洋洲外)，死亡率高达80％～90％，国际动物卫生组织将猪瘟列入A类法定传染病之一。在20世纪50年代中期，中国学者通过将猪瘟石门系强毒在兔体上连续传几百代后培育成功了一株猪瘟兔化弱毒疫苗。目前在国内外有不同“版本”的C株用于研究和疫苗生产。一般来说，C株指的是中国创制的猪瘟兔化弱毒疫苗，简称“C株” (Chinese strain,C-strain)。20世纪60年代C株从中国被引入东欧和亚洲友邦，被称为“K”株或“LC株”(Lapinized Chinesestrain)，后来又流传到西欧和拉美各国，Riems株就是C株的一个变种。因为C株安全有效，从创制至今被广泛应用于世界各国。1976年在由联合国粮农组织和欧共体召开的专家会议上，专家一致认为C株的应用对控制和消灭欧洲的猪瘟做出了重大贡献。经历了半个世纪的风雨洗礼，C株的地位和价值至今无可动摇。 1 C株是一株非常安全的疫苗 普遍认为C株疫苗非常安全。用C株疫苗接种猪只后，仅有轻微的体温反应和病毒血症，不引起发病和死亡；接种怀孕1～3月母猪不引起死胎和流产；对不同品种的各种年龄猪均无残余毒力；未吃初乳新生猪接种后无不良反应；免疫10～14日龄吮乳仔猪，不影响其发育。C株经亚欧南美几十个国家广泛应用后，一致认为它比美国的ROVA，MCV和英国的SFA株均安全。用皮质类固醇或抗胸腺血清使猪处于免疫抑制状态，接种C株也不引起发病死亡，但在同样条件下，使用其它国家兔化弱毒可引起5％～70％的死亡率。 C株演变为强毒的可能性极微。用C株疫苗通过猪体反复传代，均未发现C株毒力返强。曾将C株在猪体连续传代20～30次，仍保持弱毒特征。研究表明，用C株接种怀孕母猪不发生垂直传播。也有报道说C株病毒有时可以通过胎盘传递给胎儿，但不会导致免疫耐受，不引起任何发育异常，对怀孕母猪、胎儿和仔猪均无致病作用。至今还没有关于疫苗病毒向胎儿或新生猪传播而引起不良反应的报道。 感染猪瘟强毒2d后可以从扁桃体检测到病毒增殖，直至死亡。但用C株接种猪后，疫苗病毒的复制仅局限于淋巴样组织，能在扁桃体复制2～3周(不超过3周)，偶尔也能在其它组织(如肾脏)中检测到病毒抗原。免疫后7d在脾脏和血液尚存在微量病毒，17 d以后，血液、脾脏和骨髓中均检不出病毒。接种猪一般不通过分泌物和排泄物向外界排毒，也不向同圈猪散毒，偶尔通过接种猪传播给接触猪，但未见疫苗病毒在猪群中持久存在的报道。 用ELISA和套式RT-PCR对以不同方法增殖的C株疫苗在接种猪血液和组织中的分布进行检测，均能同时在接种扁桃体和脾脏中检测到病毒，但从用MPK细胞培养的C株疫苗接种猪的血样中检测到病毒抗原(Erns和NS2-3)早于用家兔增殖的疫苗接种猪，用细胞增殖的疫苗仅在一个大脑样品中检测到病毒，而用家兔增殖的疫苗能在70％大脑样品中检出；从血液样品中能扩增到病毒RNA。 C株口服接种也非常安全有效。用C株疫苗经口服接种家猪和野猪，接种后第2～12天从家猪鼻腔分泌物和粪便中均分离不到病毒，仅在接种后第8天在家猪部分器官(扁桃体、下领淋巴结、脾脏)中可检测到病毒，接种后第9天仅在野猪扁桃体中检测到了病毒。这表明猪接种后不大可能排毒和散毒。在欧洲，通过饵料投送高滴度C株疫苗(105.5PD50，在其中添加稳定剂)控制野猪的猪瘟，借此阻断猪瘟向家猪传播。试验证明C株疫苗对各种年龄的野猪也是安全有效的。 法国学者系统地评价了不同动物口服免疫C株疫苗的安全性和免疫保护。这项研究用47头猪、11头野猪、26只家兔、10只野兔和16只绵羊进行了7项试验。研究结果表明，口服接种3周内，所有猪发生抗体阳转；接种6周后，免疫猪可完全抵抗强毒攻击；口服接种后4d内，均未从接种猪的扁桃体、脾脏、淋巴结、胸腺、唾液、尿液和粪便中分离到疫苗病毒，与接种猪直接接触的未接种易感猪无一发生血清学阳转，这表明C株疫苗经口服能产生免疫保护，并且接种猪不会向外界散毒；野猪上的试验结果与家猪上的结果相似，绵羊和野兔口服接种后不表现任何临床症状，家兔则出现定型热和生长迟缓。试验结束时从接种绵羊没有检出抗体，而部分家兔和野兔则发生血清阳转，与接种动物接触的家兔和野兔均未发生阳转。这些结果与预期一致，即C株疫苗对家猪、野猪和绵羊是安全有效的，对家兔和野兔有轻微致病性(发热反应)或无致病性。 接种部位的局部反应从未见诸报道，但在现地可以见到牛体反应苗过敏反应的情 形。最近，有报道称C株疫苗接种引起染色体畸变，这是值得重视和进一步分析的。 与其它所有弱毒疫苗一样，C株疫苗在制苗过程中可能会混有外来