第9章吸光光度法Spectrophotometry.ppt

＊ 检测器 作用:通过光电效应，使透过吸收池的光信号变成可测的电信号的装置。 （光电管或光电倍增管） 要求：对测定波长范围内的光有快速、灵敏的响应，产生的光电流应与照射于检测器上的光强度成正比。 (1)光电管 (2)光电二极管阵列 §9-2 光度计及其基本部件 (1)光电管 涂光敏材料 光照 光敏材料 产生电子 产生电流 电压 光强度大 电流大 §9-2 光度计及其基本部件 (2)光电二极管阵列 电容器 充电 电容器 放电 光照射 再次充电 测量周期 电容器充电的电量?每个二极管检测到的光子数目成正比?光子数与光强度成正比。通过测量整个波长范围内光强的变化就可得到吸收光谱。 §9-2 光度计及其基本部件 ＊显示器 由检流计、数字显示、微机组 成的自动控制和结果处理系统 §9-2 光度计及其基本部件 分光光度计内部光的传播途径 §9-3 显色反应及显色条件的选择 1. 显色剂作用 2. 显色反应的选择 3. 影响显色反应的因素 4. 显色剂的分类 1.作用 无色或 浅色试样 有色物 +显色剂 比色 显色反应 配合反应 氧化还原反应 缩合反应 重氮化—偶氮化反应 §9-3 显色反应及显色条件的选择 2.显色反应的选择 灵敏度高 κ=104－105 (2) 选择性好 (3) 有色物组成恒定，化学性质稳定 (4) 显色剂在测定波长处无明显吸收 对比度=λmax有色物 -λmax显色剂＞60nm §9-3 显色反应及显色条件的选择 3.影响显色反应的因素 (1) 显色剂用量 根据吸光度A与显色剂浓度cR的关系来确定 cR选择——引起A变化最小处的cR（即曲线平坦处） M + R MR §9-3 显色反应及显色条件的选择 例： Fe(ssal)+ 紫红色 pH=1.8~2.5 pH=4~8 Fe(ssal)-2 橙红色 pH=8~11.5 Fe(ssal) 3 3- 黄色 (3) 显色时间和温度 由实验得出 (4) 溶剂 一般选择水作溶剂 (2) 显色溶液的pH值 测定不同pH值下，显色溶液的吸光度A，以A为纵坐标，pH为横坐标，制图。选择曲线平坦处的pH即可。 §9-3 显色反应及显色条件的选择 磺基水杨酸 (5) 共存离子的干扰 可能存在的几种情况： 本身有颜色 与显色剂反应生成有色物 消除的方法： * 加掩蔽剂 （掩蔽剂不与被测离子反应，本身及反应产物不影响测定） * 选择合适的显色反应条件 * 分离干扰离子 与显色剂 与被测物 生成更稳定的有色物 共存离子 §9-3 显色反应及显色条件的选择 显色剂的种类 : 无机显色剂 过氧化氢 钼酸铵 硫氰酸盐等 有机显色剂 生色基团：偶氮基、硫羰基、亚硝基等 助色基团：含胺基、羟基等 §9-3 显色反应及显色条件的选择 1. 入射光波长的选择 2. 参比溶液的选择 3. 读数范围的选择 §9-4 吸光度测量条件的选择 1. 入射光波长的选择 : 一般选择最大吸收波长λmax 若有干扰按实际情况而定 波长选择适当，可提高灵敏度和准确性 原则： 吸收最大，干扰最小 §9-4 吸光度测量条件的选择 2.参比溶液的选择 （在测定波长处） 溶剂空白 试样空白 试剂空白 试样+掩蔽剂 +显色剂 无色 无色 无色 有色 无色 无色 无色 略有 略有 试样 显色剂 其他试剂 参比溶液 有色 有色 其他组 分有色 选择的原则 选择的意义：扣除非待测组分的吸收，可获得被测定溶液真实的吸光度。 §9-4 吸光度测量条件的选择 3. 读数范围的选择 选择的原因 : 因为吸光度（透光度）不同读数时准确度不一样。 ÷（κbc） 浓度相对误差 透光度读数绝对误差 §9-4 吸光度测量条件的选择 结论 ： 不同透光度的相对误差（ ΔT=1％） T% T% T% 95 20.8 60 3.3 20 3.2 90 10.7 50 2.9 10 4.3 80 5.6 40 2.7 5 6.7 70 4.0 30 2.8 1 22.0 T%=10%~70% （A=1.0~0.15） ∴透光度T（A）的