常用生化试剂品名.DOC

常用生化试剂品名 Tris：Tris(Hydroxymethyl)aminomethane 三羟甲基氨基甲烷 分 子 式: NH2C(CH2OH)3 分 子 量: 121.14 TRIS 是一种最常用的生物缓冲液，常配成 PH 值为 6.8，7.4，8.0，8.8。其 PH 值随温度变化很大。一般来说，温度每升高一度，PH 值下降 0.03。 EDTA：Ethylene Diamine Tetraacetic Acid 乙二胺四乙酸 分 子 式: C10H16N2O8 分 子 量: 292.248 EDTA 是化学中一种良好的配合剂，它有六个配位原子，形成的配合物叫做鳌合 物，EDTA 在配位滴定中经常用到，一般是测定金属离子的含量。 尿素： （脲 碳酰胺; 碳酰二胺脲） 尿素： 脲; 碳酰胺 碳酰二胺脲）Urea （ 分 子 式: CH4N2O 分 子 量: 60.05 尿素易溶于水，在 20℃时 100 毫升水中可溶解 105 克。 SDS： dodecyl sulfate, sodium salt 十二烷基硫酸钠 ： 分 子 式: C12H25SO4Na 分 子 量: 288.38 溶解性： 溶于水，微溶于醇，不溶于氯仿、醚。 健康危害： 对粘膜和上呼吸道有刺激作用，对眼和皮肤有刺激作用。可引起呼 吸系统过敏性反应。 SDS 是一种已知的能够使蛋白质变性的去污剂。 它用于确定蛋白分子量的聚丙烯 酰胺凝胶电泳。它也可以用于核酸抽提操作中破坏细胞壁及裂解核酸：蛋白复合 物。在乳液聚合反应中，可充当两相溶液的乳化剂。 DTT：DL-Dithiothreitol 二硫苏糖醇 分子式为 C4H10O2S2，分子量为 154.25 常用还原剂，有抗氧化作用，进口分装。DTT 和巯基乙醇相比，作用相似，但 DTT 的刺激性气味要小很多，毒性也比巯基乙醇低很多。 DTT 的用途之一是作为巯基化 DNA 的还原剂和去保护剂。巯基化 DNA 末端硫 原子在溶液中趋向于形成二聚体，特别是在存在氧气的情况下。这种二聚化大大 降低了一些偶联反应实验（如 DNA 在生物感应器中的固定）的效率；而在 DNA 溶液中加入 DTT， 反应一段时间后除去， 就可以降低 DNA 的二聚化。 DTT 也常常被用于蛋白质中二硫键的还原， 可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形 成的蛋白质分子内或分子间二硫键。但 DTT 往往无法还原包埋于蛋白质结构内 部（溶剂不可及）的二硫键，这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性（高温 。反之，根据 DTT 存 加热或加入变性剂，如 6M 盐酸胍、8M 尿素或 1% SDS）在情况下，二硫键还原速度的不同，可以判断其包埋程度的深浅。 1mol/L 二硫苏糖醇（DTT）溶液 【配制方法】用 20ml 0.01mol/L 乙酸钠溶 液（pH5.2）溶解 3.09g DTT，过滤除菌后分装成 1ml 小份贮存于-20℃。 DTT 或含有 DTT 的溶液不能进行高压处理。 CHAPS： 3-[(3-胆固醇氨丙基 二甲基氨基 ： 胆固醇氨丙基)二甲基氨基 胆固醇氨丙基 二甲基氨基]-1-丙磺酸 丙磺酸 分子式为 C32H58N2O7，分子量为614.88 两性表面活性剂，CHAPS 是一种非变性的 zwitterionic 去垢剂、蛋白质裂解 液，用于增溶膜蛋白和裂解蛋白-蛋白之间的相互作用。 CHAPS 是两 性离子去垢剂，分子结构中具有一个胆酸和硫代甜菜碱。在紫外区的低吸 光性成为用紫外方法检测膜蛋白的首选去垢剂，CMC 值均为 8 mM。常用 于于双向电泳等实验。 原理：CHAPS 保护蛋白质的天然状态，可溶 解膜蛋白，从而解除蛋白与蛋白质间的相互作用。透析可除去。 PMSF：Phenylmethanesulfonyl fluoride，也称 Phenylmethylsulfonyl fluoride ， 或 α-Toluenesulfonyl fluoride 苯甲基磺酰氟 分子式为 C7H7FO2S，分子量为 174.19 1） 抑制丝氨酸蛋白酶（如胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶，凝血酶）和巯基蛋 白酶（如木瓜蛋白酶） ； 2） 10mg/ml 溶于异丙醇（或无水乙醇）中；它对异丙醇没有特殊要求，分 析纯即可，它也可以用 DMSO 进行配置，储存浓度同样为 100mM 3） 在室温可保存一年,一般保存在-20 度或 4 度.； 4） 工作浓度：17~174ug/ml（0.1~1mM） ，储存液浓度为 100 或 200mM； 5） 在水液体溶液中不稳定，30 分钟就会降解一半，必须在每一分离和纯 化步骤中加入新鲜的 PMSF，样品处理超过 1h,补加一次。 （见水分解，使用 前加