血清白球蛋白的离纯化及鉴定[整理后].pptVIP

下载本文档

0
0
约小于1千字
约 18页
2019-04-15 发布于江苏
举报
版权申诉

血清白球蛋白的离纯化及鉴定[整理后].ppt

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

血清白蛋白、γ-球蛋白的分离、纯化及鉴定;分离纯化的一般程序;实验目的;实验原理;1. 盐析;操作;2. 脱盐;凝胶过滤的原理;洗脱液中蛋白质及盐分的检查;二、G-25凝胶层析脱盐;3、开下端出口，使样品进入凝胶床（刚好下降到凝胶床表面），关闭出口，小心加入适量pH6.5的0.02mol/L NH4Ac缓冲液。 4、放开，流速约20滴/分钟，立即收集并检测， 20％磺基水杨酸检测到蛋白后收集三管，10滴/管。颜色最深而且无浑浊的管用于下一步操作。 5、 BaCl2检测出现白色混浊或沉淀即有盐分析出，不再收集。 6、平衡再生：继续洗脱30ml。 7、白蛋白样品脱盐。 15滴/管，收集三管。;3. 纯化;原理：离子交换剂具有带电荷的酸性基团或碱性基团作离子交换基团，通过静电作用与带有相反电荷的离子（反离子）结合。当流动相中存在其他相反电荷的离子时，就与结合在固定相交??基团上的反离子进行交换。 ;阳离子交换剂具有带负电荷的酸性基团作为离子交换基团，能吸附流动相中的阳离子。阴离子交换剂具有带正电荷的碱性基团作为离子交换基团，能吸附流动相中的阴离子。 ;;三、纯化（阴离子交换层析）;四、醋酸纤维素薄膜电泳检查;操作步骤：１．准备与点样 2. 电泳（点样面朝下，110V 1h）３．氨基黑１０B染色