第十一章章节核酸的生物合成.pptVIP

第一节 DNA的生物合成 第二节 RNA的生物合成 1、半保留复制的概念 2、DNA的半保留复制实验依据 DNA聚合酶催化的链延长反应 DNA聚合酶的3′- 5′外切酶水解位点 DNA聚合酶5′- 3′外切酶活力 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ全酶的结构和功能 大肠杆菌三种DNA聚合酶比较 连接酶连接切口 DNA聚合酶催化的链延长反应 大肠杆菌复制起点成串排列的重复序列 DNA的双向和单向复制 原核细胞DNA的半不连续复制复制过程 大肠杆菌复制体结构示意图 复制叉处前导链和随后链同时合成的工作模型 大肠杆菌染色体复制的终止 DNA聚合酶的校对功能 DNA突变的类型 DNA紫外线损伤的光裂合酶修复 DNA的损伤和切除修复 DNA的重组修复 SOS反应的机制 逆转录过程中cDNA的合成 逆转录病毒的生活周期 前导链和滞后链的合成 半不连续复制：在DNA复制过程中，一条链的合成是连续的，另一条链的合成是不连续的。 polⅢ全酶同时负责前导链和后随链的合成。 （四）终止 有终止子位点（22bp），有一种蛋白质称为终止利用基质与终止位点结合，抑制解螺旋酶的活性，阻止复制子通过终止位点。 oric 复制叉2 复制叉1 终止复制叉2 终止复制叉1 复制叉1 复制叉2 完成复制 DNA拓扑异构酶? 连锁染色体 1、前导链 连续复制完毕后： （1）polⅠ：切除引物，表现5′ 3′核酸外切酶活性； （2）polⅠ：催化合成一段DNA填补上，表现5′ 3′聚合酶活性； （3）在DNA连接酶作用下，连接上述两种DNA片段。 2、后随链 当新形成的冈崎片段延长至一定长度时： （1）polⅠ：在DNA片段与引物RNA之间切断，表现5′ 3′核酸外切酶活性； （2）polⅠ：催化合成一段DNA填补上，表现5′ 3′聚合酶活性； （3）连接修复：在DNA连接酶作用下，连接上述两种DNA片段。 polⅡ：修复错配碱基。 （五）复制后DNA再加工 两组反应： 1、起修饰作用的甲基化酶催化碱基甲基化，以防止DNA被限制性内切酶降解； 2、由多种不同的DNA修复机制组成。 四、真核细胞DNA复制 不十分清楚，与原核生物DNA复制比较： （一）一致： 1、基本机制相似。如半保留复制、半不连续复制。 2、所需酶相似。 （二）区别 真核生物 原核生物 复制起始点 多个 一个 复制方向 双向 单向 复制速度 较快 较慢 起始点是否连续复制 不 是 催化DNA链延长的酶 两种酶（polα、δ） 一种酶（polⅢ） 引物酶的结合情况 与DNA聚合酶 与解旋酶 DNA复制具有高度的真实性，以保证遗传信息一代一代传递，物种不会改变。主要有三个因素： 1、具有3′ 5′核酸外切酶活性的polⅠ、polⅢ切除参入的错误碱基； 2、复制体的组成。各种酶、蛋白质在性质、活性上相互依赖，形成网络，保证反应过程极高精确性； 3、使用RNA引物而不是DNA引物，可消除初期容易发生的错误（错配碱基）。 聚合酶 错配硷基 复制方向 正 确核苷酸 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 切除错配核苷酸 五、DNA的损伤修复 （一）突变 基因组DNA的碱基顺序发生突然而永久性的改变。 1、点突变：指一个或几个碱基对被置换。有两种形式： 转换：一个嘌呤碱基或一个嘧啶碱基转换为另一个嘌呤或嘧啶碱基。如TA被CG替换。 颠换：嘌呤碱基变成嘧啶碱基或嘧啶碱基变成嘌呤碱基。如TA被AT替换。 2、结构畸变 DNA的大段碱基发生改变。包括：插入、缺失、倒位、易位。 -T-C-T-G-C-T-G-T-A-C-G- -A-G-A-C-G-A-C-A-T-G-C- 转换 野生型基因 -T-C-G-A-C-T-G-T-A-C-G- -A-G-C-T-G-