含CpG基序重组质粒的构建及其遗传稳定性研究-预防兽医学专业论文.docxVIP

AbstractBased Abstract Based the$equ般of the selected CpG Motif with the m,∞dmm stimulation index towards chicken peripheral blood mononuclear cells(PBMC)，oligodexynucleotides(ODN)c．脚mining 5 co晒嚣 ofthe motifwas synthesized．Two pairs ofreslriction ellzyme cutting site wcle designed at each and of the ODN in order to subclone it into pcDNA3．0 bY both di“x=t。d(twice)and blunt-end(three-times) cloning．Inthisway,theplasmidscontainingdifferentcopies(5、10，20，40，60copies)ofthecpG Motifhave been constructed． 阳MC8 ofAAchicken we∞separated by ccntrifugation Ficon-Hyp明1lc density discontinuous gradient．In vitro lymphocte transformation assay was carried out using difforent do％of the recombinant plasmids pcDNAACpG-3，pcDNAACpG-4and pcDNAACpG-5鹊stimulus．LPS positive contr01．劓rrT colorimetric assay was introduced to evaluate the proiifdation ability and metabolic intensity ofthe PBMC．And the plasmid with the maximum stimulation index and the optimal dose waB achieved by comparing the results ofthe assay． E．Coli DH5acontaining the recombinant plasmid pcDNAACpG-5 was serially pas鼢ged 30 times LB solid medium with ampicillin-resistance．The plasmid was extl-act锄from each passage and the 掣mecic stability of the plasmid was identified．The results revealed that copy number of the pasmid, sequences ofthe qIG ODN and resismnc∞to锄lpicillin remained stable within 30 passages． Key words：CpG Motif,recombinant plasmids，PBMC，hereditary stability II 英文缩略表V 英文缩略表 V 独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证 书而使用过的材料。与我二同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了 明确的说明并表示了谢意。 一魏知Iv，移字研究生签名：石传∥乡夕干o v 时间加7年夕月，占日 关于论文使用授权的声明 本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科 学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不 同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 (保密的学位论文在解密后应遵守此协议) 糍：靠拯雪帆 ＼Z 6黾|墨B 小毋吼r 导师签名 时间： 年车 移月，c沙 中国农业科学院硕卜学位论文 中国农业科学院硕卜学位论文