细胞周期与肿瘤细胞正常的分裂增殖分化与衰老维持着机体.DOCVIP

PAGE PAGE 1 第二讲 细胞周期与肿瘤 细胞正常的分裂、增殖、分化与衰老维持着机体自身的稳定，细胞周期的异常会导致这一系列过程的紊乱. 许多生长因子、细胞因子、激素及癌基因产物对DNA代谢的调节都是通过影响细胞周期实现的，许多基因的表达又受到细胞周期的制约. 调控细胞周期的核心因子就是细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK，cyclin dependent kinase)，它与不同的细胞周期蛋白形成多种复合物，作用于细胞周期的不同时相，决定着细胞周期的进程. 而近几年来陆续发现的多种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白(CKI，cyclin dependent kinase inhibitor)，更加深了对肿瘤发生机制的了解。 目前公认的细胞周期调控模式是细胞周期在不同时相的多个调控点上受到调节. 其中有三个调控点最为重要，它们就是G1/S,G2/M和有丝分裂中期/后期的交界处， 在这些调控点上的失控就很容易导致肿瘤的发生. 到目前为止，已有三类细胞周期调控因子被发现，分别是细胞周期蛋白(cyclin)，细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制物(CKI)，它们之间的相互作用调节着细胞周期的进程。 1. 细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK) 20世纪70年代初，Masui et al从蛙卵中发现一种能够促进细胞成熟和分裂的因子，被称为成熟促进因子(MPF, maturation promoting factor)，同时Nurse et al发现和建立了一种酵母突变株，发现有一类基因与细胞周期调节密切相关，称为细胞分裂周期基因(cdc基因，cell division gene)，它们控制着细胞周期的启动及各时相的转换，其中以cdc2最为重要. cdc2基因的编码产物后确定与MPF为同一物质. 现发现cdc2激酶广泛存在于从酵母到人类多种生物中，形成了一个庞大的家族. 目前发现的细胞周期蛋白依赖性激酶主要有CDK1～6，cdc2已被命名为CDK1，这些激酶中与肿瘤的发生关系最为密切的有其中三种：CDK2，CDK4和CDK6。 CDK是一类重要的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，以复合物形式出现. 该复合物分为催化亚基和调节亚基两部分. 催化亚基即为CDK本身，有三个重要的功能区：第一功能区在9～38残基之间，是ATP的结合部位和该酶的活性部位；第二功能区在42～51位残基之间，是调节亚基的结合部位；第三功能区在177～208位残基之间，是p13sucl的结合部位. 调节亚基就是cyclin，在细胞周期的特定时相与CDK结合，促进其活性。 CDK的活性调节方式主要有三种：第一种是磷酸化和脱磷酸化调节，CDK可由一种CDK活化激酶(CAK，CDK,activating kinase)磷酸化后激活，而cdc2激酶的14-苏氨酸和15-酪氨酸残基由cdc25介导的脱磷酸作用后，才能激活；第二种是由其调节亚基cyclin起作用的. cyclin可能使底物改变构象，使之易于与不同的CDK结合，而且只有与cyclin结合后的CDK才有活性. 另外只有cyclin的降解才能使CDK最终失活，如在M后期，由于cyclinB的降解，cdc2失去活性，细胞得以退出M期. 如果cyclinB降解受阻，细胞将停滞于M期；第三种是CKI对CDK的调节作用，CKI有分别与cyclin和CDK结合的区域，当CKI和CDK结合后，阻止了CAK对CDK的磷酸化作用，使CDK不能激活。 CDK的主要生物学作用是启动DNA的复制和诱发细胞的有丝分裂，其生物学作用的异常可能导致肿瘤的发生. 与肿瘤发生较为密切的CDK4到目前为止还没有发现存在基因突变，但在某些肿瘤细胞系中CDK4和CDK6有过度表达的现象. 过度表达的CDK4还可使细胞对TGF-β的生长抑制作用失去敏感性. 2. 细胞周期蛋白(cyclin) 细胞周期蛋白是一类随着细胞周期的不同时相而发生变化的蛋白质，并因此而得名，在高等的真核细胞中，细胞周期蛋白主要有五种：cyclinA,B,C，D，E，这五种细胞周期蛋白中都含有100～150个氨基酸的保守区，称为细胞周期蛋白盒(cyclin box)，能与CDK结合. 根据cyclin调控细胞周期时相的不同，又可分为G1期和M期两类. 2.1 G1期细胞周期蛋白 G1期细胞周期蛋白包括C，D，E三种，是指在G1期和G1/S交界处发挥作用、启动细胞周期并能促进DNA合成的细胞周期蛋白. cyclinD包括三个亚型：cyclinD1,D2和D3. 这三个亚型各有其组织特异性，但每种组织至少表达一种cyclinD的亚型. 目前对cyclinD1的研究最为深入，编码人类cyclinD1的基因CCND